Resolución Nº 33 - Procedimiento específico de muestreo para diagnóstico de plagas en cultivos de banano

4 -- Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 QUINTA.- En los casos de duda que surjan de la aplicación del presente Acuerdo, el Ministerio de Relaciones Laborales absolverá las consultas respectivas, conforme lo determina el artículo 51 letra i) de la Ley Orgánica del Servicio Público. SEXTA.- En las instituciones del Estado que hubiesen desconcentrado funciones o delegado competencias, quien haga sus veces será responsable de sujetarse a lo establecido en el presente Acuerdo. DISPOSICIONES TRANSITORIAS PRIMERA.- Las instituciones que a la fecha de expedición del presente Acuerdo, mantengan contratos suscritos para la dotación de uniformes con valores que sobrepasen los montos máximos establecidos, deberán mantenerlos y dichos uniformes no podrán ser renovados en menos de dos años desde su entrega; y, para su renovación deberán aplicar el presente Acuerdo. SEGUNDA.- Las instituciones que conforman el Presupuesto General del Estado que a la fecha de expedición de este Acuerdo no cuenten con la respectiva asignación presupuestaria, a fin de atender el mencionado beneficio, deberán solicitar de forma previa el correspondiente dictamen presupuestario al Ministerio de Finanzas y, a partir de su aprobación, se sujetarán a lo dispuesto en este Acuerdo. TERCERA.- Las instituciones del Estado que no forman parte del Presupuesto General del Estado deberán sujetarse a lo dispuesto en el Código Orgánico de Planificación y Finanzas Públicas para la implementación de este beneficio. Artículo Final.- El presente Acuerdo entrará en vigencia a partir de su publicación en el Registro Oficial. Dado en la ciudad de San Francisco de Quito, Distrito Metropolitano, a 06 de septiembre de 2013. Comuníquese y Publíquese. f.) Dr. Francisco Vacas Dávila, Ministro de Relaciones Laborales. DAJ-20132CE-0201.0033 EL DIRECTOR EJECUTIVO DE LA AGENCIA ECUATORIANA DE ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD DEL AGRO - AGROCALIDAD Considerando: Que, el artículo 13 de la Constitución de la República del Ecuador establece que las personas y colectividades tienen derecho al acceso seguro y permanente a alimentos sanos, suficientes y nutritivos; preferentemente producidos a nivel local y en correspondencia con sus diversas identidades y tradiciones culturales; Que, el articulo 281 numeral 13 de la Constitución de la República del Ecuador establece que la soberanía alimen taria constituye un objetivo estratégico y una obligación del Estado para garantizar que las personas, comunidades, pueblos y nacionalidades alcancen la autosuficiencia de alimentos sanos y culturalmente apropiado de forma permanente. Para ello, será responsabilidad del Estado: Prevenir y proteger a la población del consumo de alimentos contaminados o que pongan en riesgo su salud o que la ciencia tenga incertidumbre sobre sus efectos; Que, el artículo 24 de la Ley Orgánica del Régimen de la Soberanía Alimentaria establece que la sanidad e inocuidad alimentarias tienen por objeto promover una adecuada nutrición y protección de la salud de las personas y prevenir, eliminar o reducir la incidencia de enfermedades que se puedan causar o agravar por el consumo de alimentos contaminados; Que, el artículo 1 de la Ley de Sanidad Vegetal publicada en el Registro Oficial No. 315 de 16 de abril del 2004 establece que le corresponde al Ministerio de Agricultura, a través del SESA hoy la Agencia Ecuatoriana de Aseguramiento de la Calidad del Agro - AGROCA LIDAD, estudiar, prevenir y controlar las plagas, enfermedades y pestes que afecten a los cultivos agrícolas; Que, mediante Decreto Ejecutivo Nº 1449 publicado en el Registro Oficial Nº 479 del 2 de diciembre de 2008, se reorganiza el Servicio Ecuatoriano de Sanidad Agrope cuaria transformándolo en Agencia Ecuatoriana de Aseguramiento de la Calidad del Agro- AGROCALIDAD, como una entidad técnica de Derecho Público, con personería jurídica, patrimonio y fondos propios, desconcentrada, con independencia administrativa, económica, financiera y operativa; con sede en Quito y competencia a nivel nacional, adscrita al Ministerio de Agricultura y Pesca; Que, el artículo 6 del Estatuto Orgánico de Gestión Organizacional por procesos de la Agencia Ecuatoriana de Aseguramiento de la Calidad del Agro – AGROCA LIDAD, expedido con Resolución Nº 6, publicada en Registro Oficial Suplemento 107 del 05 de marzo de 2009, establece la misión de AGROCALIDAD como la Autoridad Nacional Sanitaria, Fitosanitaria y de Inocuidad de los Alimentos, encargada de la definición y ejecución de políticas, y de la regulación y control de las actividades productivas del agro nacional, respaldada por normas nacionales e internacionales, dirigiendo sus acciones a la protección y mejoramiento de la producción agropecuaria, la implantación de prácticas de inocuidad alimentaria, el control de la calidad de los insumos, el apoyo a la preservación de la salud pública y el ambiente, incorporando al sector privado y otros actores en la ejecución de planes, programas y proyectos específicos; Que, mediante Acción de Personal No. 290 de 19 de junio del 2012, el Señor Javier Ponce Cevallos, Ministro de Agricultura, Ganadería, Acuacultura y Pesca, designa, al Ing. Diego Vizcaíno, como Director Ejecutivo de la Agencia Ecuatoriana de Aseguramiento de la Calidad del Agro - AGROCALIDAD; Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 -- 5 Que, mediante Memorando No. MAGAP-DSL/AGRO CALIDAD-2013-000385-M de 08 de abril del 2013, el Director de Servicios de Laboratorios AGROCALIDAD solicita que se proceda a la legalización del documento “Procedimiento de Envió de Muestras para Diagnostico de Plagas en Cultivos de Banano (PEM-LSV-001, IMBF001, IMBE0002, IMBN003); y En uso de las atribuciones legales que le concede el Artículo 3 inciso cuarto; del Decreto Ejecutivo Nº 1449 y el artículo 8.1, literal b, numeral 4, del Estatuto Orgánico de Gestión Organizacional por procesos de la Agencia Ecuatoriana de Aseguramiento de la Calidad del Agro AGROCALIDAD. Resuelve: Artículo 1.- Adoptar el PROCEDIMIENTO ESPE CÍFICO DE MUESTREO PARA DIAGNÓSTICO DE PLAGAS EN CULTIVOS DE BANANO, documento que se adjunta como ANEXO 1 y que forma parte integrante de la misma. Artículo 2.- Adoptar el INSTRUCTIVO DE MUES TREO PARA DIAGNÓSTICO DE PATÓGENOS EN CULTIVOS DE BANANO, documento que se adjunta como ANEXO 2 y que forma parte integrante de la misma. Artículo 3.- Adoptar el INSTRUCTIVO DE MUES TREO PARA DIAGNÓSTICO ENTOMOLOGÍCO DE PLAGAS EN CULTIVOS DE BANANO, documento que se adjunta como ANEXO 3 y que forma parte integrante de la misma. Artículo 4.- Adoptar el INSTRUCTIVO DE MUE TREO PARA DIAGNÓSTICO DE NEMATODOS EN CULTIVOS DE BANANO, documento que se adjunta como ANEXO 4 y que forma parte integrante de la misma. Artículo 5.- De la ejecución de la presente Resolución encárguese a la Dirección de Sanidad Vegetal de AGROCALIDAD. COMUNÍQUESE, PUBLÍQUESE Y CÚMPLASE. Dado en Quito, D.M. 18 de Julio del 2013. f.) Ing. Diego Vizcaíno Cabezas, Director Ejecutivo de la Agencia de Aseguramiento, de la Calidad del Agro – Agrocalidad. ANEXO 1 LABORATORIOS DE DIAGNOSTICO VEGETAL PROCEDIMIENTO PEM/L-DV/01 PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE MUESTREO PARA DIAGNÓSTICO DE PLAGAS EN CULTIVOS DE BANANO Rev. 2 Fecha de Rev.: 18 de ABRIL DEL 2013 REV. Nº PASA A REV. Nº FECHA HOJA/S CAUSA DEL CAMBIO 1 2 22-04-2013 1-8 Actualización de información Elaborado por: Revisado por: Aprobado por: Nombre Bioq. Verónica Ramírez Coordinadora del área de Diagnóstico Vegetal Dra. Olga Pazmiño Responsable de Calidad Dr. Luis Ramos Director de Servicios de Laboratorios Firma Fecha 22-04-2013 23-04-2013 22-04-2013 6 -- Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 PEM/ L-SV/ 01 Rev. 1 ÁREA DE DIAGNÓSTICO VEGETAL PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE MUESTREO PARA DIAGNÓSTICO DE PLAGAS EN CULTIVOS DE BANANO Hoja ÍNDICE 1. OBJETO 2. ALCANCE 3. REFERENCIAS 4. GENERAL 5. DESCRIPCIÓN 6. ANEXOS 1. OBJETO Establecer el procedimiento a seguir para la toma de muestras en cultivo de banano con la finalidad de diagnosticar patógenos causales de enfermedades. 2. ALCANCE Este procedimiento esta dirigido a los técnicos de laboratorio, inspectores fitosanitarios, personal de vigilancia y personal técnico autorizado, quienes van a realizar las actividades de recolección y toma de muestras en cultivos de banano, así como la preservación y envió de muestras a los Laboratorios de Diagnóstico Vegetal perteneciente a la Dirección de Servicios de Laboratorio de AGROCALIDAD. 3. REFERENCIAS Procedimiento Específico para toma y envío de muestras para Análisis Fitopatológico. (PEM/L-FP/01) Procedimiento Específico para toma y envío de muestras para Análisis Entomologicoa (PEM/L-E/01). Procedimiento Específico para toma y envío de muestras para Análisis Nematologíco (PEM/L-N/01) 4. GENERAL 4.1. Responsabilidades 4.1.1 Técnico de Muestreo.- Persona entrenada y capacitada para identificar la sintomatología y toma de muestras, es además el responsable de preservar y enviar las muestras al laboratorio. 4.1.2 Analista de Laboratorio.- Persona capacitada para identificar la sintomatología y toma de muestras, es además el responsable de preservar las muestras al laboratorio. El analista de laboratorio es el responsable del análisis de las muestras entregadas al laboratorio. 4.1.3 Responsable de Laboratorio.- Persona encargada de coordinar, planificar actividades, dar seguimiento a los proyectos y actividades referentes al laboratorio, además es la persona responsable ante las autoridades de justificar o emitir aclaraciones sobre los resultados emitidos en el laboratorio. 4.2. Definiciones 4.2.1 Muestra: Es una o más unidades, extraídas mediante un procedimiento al azar de un lote, que sirva para obtener la información necesaria, que permite apreciar una o más características de ese lote, lo cual servirá de base para tomar una decisión sobre dicho lote o sobre el proceso que lo produjo. 4.2.2 Plaga: Cualquier especie, raza o biotipo vegetal o animal o agente patógeno dañino para las plantas o productos vegetales [FAO 1990; revisado FAO, 1995; CIPF, 1997]. 4.2.3 Lote: Conjunto de unidades de un solo producto básico, identificable por su composición homogénea, origen, etc., que forma parte de un envío [FAO, 1990]. 4.2.4 Parásito: Organismo que vive dentro o sobre un organismo mayor, alimentándose de éste [NIMF n.º 3, 1996]. 4.2.5 Diagnóstico de plaga: Proceso de detección e identificación de una plaga [NIMF n. º 27, 2006]. 4.3. Medidas de Seguridad El personal deberá estar provisto del equipo de protección como por ejemplo: guantes, gafas, mandil, etc, es necesario que el uso sea obligatorio ya que se busca evitar daños del personal, producidos por el proceso o contaminación de la muestra. De haber algún accidente (corte, ataque de insectos, ataque de víboras o animales rastreros, etc.) se debe acudir inmediatamente al dispensario médico más cercano o comunicarse con el 911, 102, 101, etc. Este procedimiento debe ser ejecutado por los inspectores fitosanitarios o técnicos entrenados de AGROCALIDAD, quienes deben tener pleno conocimiento del mismo y deben estar dotados del equipo de protección, así como los materiales necesarios para cumplir con sus objetivos. 5. DESCRIPCIÓN a) Para la toma de muestra en cultivo de banano con afecciones fitopatologías considerar la sintomatología de la Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 -- 7 planta, para este diagnóstico inicial el responsable del muestreo debe observar el color, forma, textura de las hojas del banano, frutos, cormo, seudotallo y tallo. Adicionalmente, considerar la información del Instructivo de Muestreo para Diagnóstico de Patógenos en Cultivos de Banano ( I/L-FP/01). b) Cuando se observen insectos, ácaros, u otros invertebrados en cultivos de banano recolectarlos siguiendo la instrucciones descrita en el Instructivo de Muestreo para Diagnóstico Entomológico de Plagas en Cultivos de Banano (I/L-E/01). c) Cuando se observen síntomas de presencia de nematodos en raíces y suelos tomar una muestra y seguir las instrucciones establecidas en el Instructivo de Muestreo para Diagnóstico de Nematodos en Cultivos de Banano (I/L-N/01). 6. ANEXOS ANEXO 1: Instructivo de Muestreo para Diagnóstico de Patógenos en Cultivos de Banano ( I/L FP/01). ANEXO 2: Instructivo de Muestreo para Diagnóstico Entomológico de Plagas en Cultivos de Banano (I/L-E/01). ANEXO 3: Instructivo de Muestreo para Diagnóstico de Nematodos en Cultivos de Banano (I/L N/01). ANEXO 2 LABORATORIO DE FITOPATOLOGÍA INSTRUCTIVO I/L-FP/01 DE MUESTREO PARA DIAGNÓSTICO DE PATÓGENOS EN CULTIVOS DE BANANO Rev. 2 Fecha de Rev.: 22 DE ABRIL DEL 2013 REV. Nº PASA A REV. Nº FECHA HOJA/S CAUSA DEL CAMBIO 1 2 30-04-2013 1-19 Actualización de información 8 -- Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 I/L-FP/01 Rev. 1 LABORATORIO DE FITOPATOLOGÍA INSTRUCTIVO DE MUESTREO PARA DIAGNÓSTICO DE PATÓGENOS EN CULTIVOS DE BANANO Hoja ÍNDICE 1. OBJETO 2. MATERIALES y REACTIVOS 3. INSTRUCCIONES 4. ANEXOS 1. OBJETO Establecer actividades de toma y envío de muestras para el análisis de patógenos en cultivo de banano en el Laboratorio de Fitopatología. 2. MATERIALES Y REACTIVOS Podadora o cuchilla Funda de Papel o papel empaque Funda de plástico Etiquetas Cinta adhesiva Marcador Alcohol antiséptico 3. INSTRUCCIONES 1. Identificar plantas con síntomas característicos de la enfermedad, en sus diferentes etapas: inicial, medio y final (Ver Anexo 1). 2. Tomar muestras representativas con presencia de síntomas en las diferentes fases (inicial y media) del desarrollo de la enfermedad (según se indica a continuación), tomarla muestra con la ayuda de una cuchilla o machete previamente desinfectado con alcohol antiséptico. Para análisis virológico se tomará tejido joven, el número de muestras debe ser de mínimo 2 hojas con sintomatología característica. Para análisis bacteriológico se tomará tejido vascular procedente de cormos, pseudotallos, raquis, vástagos y frutos con sintomatología característica, la cantidad mínima de 1 kg. Para análisis micológico: a) Fusarium oxysporum f.sp. cúbense, se tomarán muestras de pseudotallos y cormos. b) Sigatoka negra, se tomarán muestras de hojas con sintomatología característica. 3. Después de la toma de cada muestra, desinfectar la cuchilla o el machete con alcohol antiséptico. 4. Colocar cada una de las muestras dentro de una bolsa de papel. 5. Colocar la etiqueta con los datos de descripción en cada muestra (según Anexo 2). 6. Colocar la funda de papel dentro de una bolsa plástica. 7. Conservar a 4 °C para su posterior procesamiento. 8. Enviar la muestra el mismo día de recolección al Laboratorio de Fitopatología de AGROCALIDAD para su análisis, tiempo óptimo de envió 24 horas. Adjuntar a la muestra el formato de Orden de trabajo (Anexo 3). 4. ANEXOS ANEXO 1: Enfermedades importantes del cultivo de banano ANEXO 2: Etiqueta de la muestra ANEXO 3: Formato de Orden de trabajo Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 -- 9 ANEXO 1 ENFERMEDADES IMPORTANTES DEL CULTIVO DE BANANO ENFERMEDADES VIRALES N° ENFERMEDAD AGENTE CAUSAL SÍNTOMAS CARACTERÍSTICOS 1 Mosaico de las brácteas (BBrMV) Virus Mosaico café en la brácteas Estrías foliares en forma de huso, paralelas a las nerviaciones y en el pseudotallo Cambios de pigmentación en pseudotallo Abultamiento de las venas Moteado oscuro o necrosis interna en las vainas. Malformación de frutos Fig 1. Sintomas de virus BBrMV 10 -- Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 Figura 2. Síntomas del virus de CMV N° ENFERMEDAD AGENTE CAUSAL SÍNTOMAS CARACTERÍSTICOS 2 Mosaico del pepino (CMV) Virus Mosaico típico en las hojas Deformación foliar Amarillamiento Necrosis de la hoja cigarro Disminución del crecimiento y el rendimiento Es más fácil observar los síntomas en las planta hijas Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 -- 11 Fig. 3. Sintomas de virus BSV N° ENFERMEDAD AGENTE CAUSAL SÍNTOMAS CARACTERÍSTICOS 3 Estriado del banano (BSV) Virus Líneas cloróticas leves y quebradas en hojas Mayor cantidad de líneas cloróticas y necrosis en hojas Necrosis de las hojas nuevas Necrosis interna del pseudotallo Muerte de la planta 12 -- Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 Fig. 4. Síntomas de virus BBTV N° ENFERMEDAD AGENTE CAUSAL SÍNTOMAS CARACTERÍSTICOS 4 Cogollo racimoso (BBTV) Virus Diversos síntomas en todas las partes aéreas de la planta. Cogollo racimoso (roseta); síntomas foliares (código morse: puntos y rayas); “garfios” (“J”): Ausencia de fruticificación o distorsión de racimos y frutos. Enanismo Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 -- 13 ENFERMEDADES BACTERIANAS N° ENFERMEDAD AGENTE CAUSAL SÍNTOMAS CARACTERÍSTICOS 1 Moko Ralstonia solanacearum Marchitez de la planta, hasta su muerte. La marchitez puede ser gradual en función de la intensidad de la enfermedad. Síntoma inicial: amarillamiento (amarillo-verdoso) de la hoja central o bandera hacia hojas de mayor edad. Las hojas infectadas se marchitan, se doblan (ruptura a nivel de la unión del limbo con el pecíolo) y quedan adheridas a la planta. Las hojas más viejas presentan bordes amarillos con márgenes oscuros. Puntos oscuros en el interior de los nervios centrales y el raquis (cortes transversales) Cormos infectados presentan bandas de color marrón o negro (corte transversal) Las brácteas se marchitan, se oscurecen y necrosan Deformación y pudrición del fruto, que se ennegrece, se seca y se desprende. Presentan necrosis interna seca y café oscuro. Madurez prematura e irregular (en frutos desarrollados); grietas y necrosis en la cáscara. Los hijos de las cepas infectadas muestran amarillamiento y mueren. Fig. 5 Enfermedad Bacteriana: Ralstonia solanacearum 14 -- Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 N° ENFERMEDAD AGENTE CAUSAL SÍNTOMAS CARACTERÍSTICOS 2 Bugtok Ralstonia solanacearum Produce síntomas sólo en los frutos: necrosis interna central Fig 6. Ralstonia solanacearum N° ENFERMEDAD AGENTE CAUSAL SÍNTOMAS CARACTERÍSTICOS 3 Enfermedad rojiza Ralstonia solanacearum Marchitez de la planta, hasta su muerte. La marchitez puede ser gradual en función de la intensidad de la enfermedad. Síntoma inicial: amarillamiento (amarillo-verdoso) de la hoja central o bandera hacia hojas de mayor edad. Las hojas infectadas se marchitan, se doblan (ruptura a nivel de la unión del limbo con el pecíolo) y quedan adheridas a la planta. Las hojas más viejas presentan bordes amarillos con márgenes oscuros. Puntos oscuros en el interior de los nervios centrales y el raquis (cortes transversales) Fig 7. Ralstonia solanacearum Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 -- 15 N° ENFERMEDAD AGENTE CAUSAL SÍNTOMAS CARACTERÍSTICOS 4 Marchitez bacteriana por Xanthomonas Xanthomonas vasicola pv. musacearum Presencia de hojas amarillas que se doblan y necrosan. Al cortar frutos, raquis, pseudotallos y cormos de plantas infectadas, se observa un exudado amarillo característico. Manchas internas oscuras en los frutos. Las brácteas de las plantas infectadas se oscurecen y se secan. Los racimos presentan madurez irregular. Fig 8. Enfermedad Bacteriana: Xanthomonas vasicola pv. musacearum 16 -- Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 N° ENFERMEDAD AGENTE CAUSAL SÍNTOMAS CARACTERÍSTICOS 5 Pudrición blanda Erwinia chrysanthemi y E. carotovora (actualmente reclasificados como Dickeya paradisiaca y Pectobacterium carotovorum) Marchitez, pudrición acuosa o blanda en pseudotallos y cormos Pudrición de frutos Las plantas infectadas pueden caer. Produce también marchitez y muerte en plantas jóvenes. Fig.9. Sintomatología de enfermedad Bacteriana ENFERMEDADES FÚNGICAS N° ENFERMEDAD AGENTE CAUSAL SÍNTOMAS CARACTERÍSTICOS 1 Mal de Panamá Fusarium oxysporum f.sp. cubense Marchitez en la planta, necrosis y pudrición de las raíces, rizomas y vasos del pseudotallo . Primeros síntomas : aparición de estrías verde pálido en la base del pecíolo y la decoloración rojiza de los vasos debajo de la epidermis del pecíolo, dos semanas antes de iniciar la marchitez (2-5 meses después de infección de las raíces ) Acortamiento de la hoja emergente Manchas pardo rojizas en el interior de las vainas Amarillamiento de las hojas más viejas hasta quedar completamente seca y de color café Coloración de haces vasculares en el pseudotallo Marchitez de las hojas que cuelgan. Pseudotallos de plantas muertas en pie durante 1-2 meses. Rajadura del pseudotallo en plantas de crecimiento activo Diseminación por material de propagación infectado. Se encuentra en suelo, agua y aire. Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 -- 17 Fig. 10. Síntomas de hongos: Fusarium oxysporum f.sp. cubense Fig. 11. Síntomas de hongos: Mycosphaerella fijiensis N° ENFERMEDAD AGENTE CAUSAL SÍNTOMAS CARACTERÍSTICOS 2 Sigatoka negra Mycosphaerella fijiensis Manchas marrón oscuro en el envés del limbo de 1 a 2 mm de largo, que aumentan de tamaño formando lesiones necróticas con halos amarillos y centro gris claro. 18 -- Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 ANEXO 2 ETIQUETA DE LA MUESTRA Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 -- 19 ANEXO 3 20 -- Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 ANEXO 3 LABORATORIO DE ENTOMOLOGÍA INSTRUCTIVO I/L-E/01 DE MUESTREO PARA DIAGNÓSTICO ENTOMOLÓGICO DE PLAGAS EN CULTIVOS DE BANANO Rev. 2 Fecha de Rev.: 27 DE JUNIO DEL 2013 REV. Nº PASA A REV. Nº FECHA HOJA/S CAUSA DEL CAMBIO 1 2 21-06-2013 1-8 Actualización de información I/L-E/01 Rev. 1 LABORATORIO DE ENTOMOLOGÍA INSTRUCTIVO DE MUESTREO PARA DIAGNÓSTICO ENTOMOLOGÍCO DE PLAGAS EN CULTIVOS DE BANANO Hoja ÍNDICE 1. OBJETO 2. MATERIALES REACTIVOS 3. INSTRUCCIONES 4. ANEXOS 1. OBJETO Establecer instrucciones para toma y envío de muestras al Laboratorio de Entomología para diagnóstico de plagas en cultivo de banano o en sitios de almacenamiento. 2. MATERIALES Y REACTIVOS Tablas blancas de contraste Funda plástica Red entomológica Trampa de luz negra tipo embudo Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 -- 21 GPS Lápiz HB Navaja Pinceles N° 000 Pinzas suaves Succionador (personal) de insectos Tijera de podar (es recomendable usarla para evitar heridas graves en la planta) Linterna u Optivisor con linterna de frente Lupa 20 x Etanol al 70% (evitar el alcohol antiséptico mentolado) Solución Alcohol-Glicerina-Ácido acético (AGA) Fundas plásticas zip-lock Crioviales (frasco de polipropileno de tapa rosca) de 2 ml. Frascos eppendorf de 2 ml. Frascos herméticos con tapa rosca (de polipropileno o vidrio) de varios tamaños (5,5cm x 2,5 cm, 9,7 cm x 2,8 cm, 10 cm x 4,5 cm) Recipientes plásticos con tapa hermética Sobres de papel encerado Perforador de sacos Pala recta 3. INSTRUCCIONES 3.1. Tipos de Muestreo a) MUESTREO DIRIGIDO La persona encargada del muestreo elige los sitios a muestrear basándose en reportes, infestación previa, sitios de interés, denuncias, etc., es importante en este tipo de muestreo lograr muestras representativas del (los) insecto(s) de interés. Los muestreos dirigidos pueden ser realizados siguiendo dos patrones: 1. Recorrido en X: Consiste en dibujar una X imaginaria en el área a ser muestreada y recolectar las muestras en los extremos y en el centro hasta completar la cantidad necesaria. 2. Recorrido en ZIG-ZAG: Consiste en dibujar un ZIG ZAG imaginario en el área a ser muestreada y recolectar la muestra en cada punto de intersección hasta completar la cantidad necesaria. b) MUESTREO ALEATORIO Se lo realiza con la finalidad de detectar eventos inesperados. El muestreo aleatorio consiste en darle a cada uno de los elementos de la población la misma probabilidad de ser incluido en muestra. Para este método se utiliza una tabla de números aleatorios o una selección al azar para la recolección de la muestra. 3.2. Instrucciones 1. Revisar el cultivo y muestrear las zonas o focos que presentan fuertes síntomas de daño por insectos, según el tipo de insecto a muestrear. 2. Determinar el tipo de muestreo a emplear. 3. Seguir las indicaciones descritas a continuación para el muestreo de los distintos tipos de artrópodos. MUESTREO DE ÁCAROS 1. Sacudir las hojas (tejjido vegetal) sobre una superficie de color blanco para que los ácaros caigan sobre ella. 2. Tomar con un pincel Nº 000 los especímenes que se recolectan en la superficie blanca. 3. Una vez que se ha trasladado los especímenes a un criovial de 2 ml con etanol al 70% tapar y colocar dentro de una funda plástica zip-lock. 4. La muestra prevìo al envìo al laboratorio debe ser identificada deacuerdo a lo establecido en el Anexo 1. MUESTREO DE ÁFIDOS 1. Recorrer el cultivo en el campo o invernadero (en zig zag, en X o de manera aleatoria) y observar la presencia de áfidos en los brotes de las plantas o en el envés de las hojas. 2. Colectar cuidadosamente los áfidos con un pincel N° 000 y trasladarlos a un criovial de 2 ml conteniendo etanol al 70%. 3. Cerrar el criovial y colocarlo dentro de una funda plástica zip-lock. 4. La muestra previo al envío al laboratorio debe ser identificada deacuerdo a lo establecido en el Anexo 1. MUESTREO DE COCHINILLAS Y ESCAMAS (insectos presentes sobre hojas, tallos, axilas o raíces) 22 -- Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 1. Recorrer el cultivo en el campo (en zig-zag, en X o de manera aleatoria) observando la presencia de daños ocasionados por escamas (mielecilla, fumagina o amarillamiento de hojas). 2. Observar la presencia de escamas sobre los tallos, entrenudos y axilas de plantas, arbustos y/o árboles. 3. Colectar las cochinillas y escamas mediante una de las dos formas descritas a continuación: Opción 1: Tomar las escamas con un pincel humedecido en alcohol y trasladarlas a un frasco con etanol al 70 %. Opcion 2: Cortar una sección de tallo, rama o raíz con una tijera de podar, colocarla dentro de un sobre de papel encerado y cerrar el sobre con cinta adhesiva. 4. Para la descripción de los datos de la muestra en el Formato de Orden de trabajo (ANEXO 2). 5. Colocar los sobres de papel encerado y el Formato de Identificación de la Muestra dentro de una caja de cartón o espuma flex y enviar las muestras. NOTA Si se sospecha de la presencia de escamas en las hojas, hacer un hoyo con una pala recta y explorar las raíces, con el objeto de verificar la presencia de insectos. 3.3. Recomendaciones para envío de muestras 3.3.1. Etiquetar siempre la muestra o muestras, esta(s) etiqueta debe encontrarse en la parte externa de la funda y debe tener la información legible e indeleble (ver ANEXO 1). 3.3.2. Registrar los datos de la muestra en el formato de Orden de trabajo (ver ANEXO2), cuya copia debe ser entregada junto con la muestra en el Laboratorio. ANEXOS ANEXO 1: Etiqueta de muestra ANEXO 2: Formato de Orden de trabajo. ANEXO 1 ETIQUETA DE LA MUESTRA Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 -- 23 ANEXO 3 24 -- Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 ANEXO 4 LABORATORIO DE NEMATOLOGÍA INSTRUCTIVO I/L-N/01 DE MUESTREO PARA DIAGNÓSTICO DE NEMATODOS EN CULTIVOS DE BANANO Rev. 2 Fecha de Rev.: 22 DE ABRIL DEL 2013 REV. Nº PASA A REV. Nº FECHA HOJA/S CAUSA DEL CAMBIO 1 2 22-04-2013 1-7 Actualización de información I/L-N/01 Rev. 1 LABORATORIO DE NEMATOLOGÍA INSTRUCTIVO DE MUESTREO PARA DIAGNÓSTICO DE NEMATODOS EN CULTIVOS DE BANANO Hoja 24 de 40 ÍNDICE 1. OBJETIVO 2. MATERIALES 3. INSTRUCCIONES 4. ANEXOS 1. OBJETO Establecer las instrucciones de muestreo para el envío de muestras representativas al Laboratorio de Nematología para el análisis de patógenos en las raíces del banano. 2. MATERIALES Funda plástica Etiqueta Pala cuadrada para toma de muestras. 3. INSTRUCCIONES 1. El muestreo del cultivo debe ser realizado considerando plantas cuyas características sean similares. 2. Las plantas a muestrear deben tener la planta madre (flor en estado descendente) y una planta hijo (con altura de 1,5 a 2 m, en etapa de crecimiento). Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 -- 25 3. Es importante que se limpie el área externa de alrededor del árbol de ramas, hojas etc. 4. Se debe realizar un hoyo o hueco prevío el muestreo este debe ser realizado entre la planta madre y la planta hijo. 5. El hueco o el hoyo debe ser de 30 cm de ancho y 15 cm de profundidad y debe ser realizada con una pala cuadrada, con la finalidad de formar un rectángulo. 6. Recolectar las raíces que se describieron en el numeral anterior 7. Poner las muestras en fundas de plásticas, bien cerradas para evitar la pérdida de humedad. 8. Etiquetar la muestra o muestras, esta/as debe encontrarse en la parte externa de la funda y debe tener la información clara, (ver anexo 2). 9. Se registrará todos los datos de la muestra en el formato de Orden de trabajo (ver anexo 3), y enviar adjunto con la muestra. 10. Se recomienda considerar que el tiempo más apropiado para muestrear es al empezar una cambio de época climática (ej.: verano a invierno o invierno a verano). 11. Enviar la muestra el mismo día de recolección al Laboratorio para su análisis, considerar que la conservación de la muestra es importante para el adecuado muestreo (conservar en refrigeración a 10-15 °C, tiempo óptimo de envió 24 horas). 12. Las muestras deben ser etiquetadas (ver anexo 2) y enviar al laboratorio con el Formulario de Orden de trabajo ver Anexo 3. 4. ANEXOS ANEXO 1: Fotos de muestreo ANEXO 2: Etiqueta de muestra ANEXO 3: Formulario de Orden de Trabajo ANEXO 1 IMAGENES DE MUESTREO EN CAMPO Fig. 1 Recolección de muestra para análisis nematológico 26 -- Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 ANEXO 2 ETIQUETA DE LA MUESTRA Suplemento -- Registro Oficial Nº 85 -- Viernes 20 de septiembre de 2013 -- 27 ANEXO 3