Arrêté n°250 MSP.DSPH du 18 novembre 1988 fixant les normes à respecter pour la confection de certaines denrées alimentaires et de boissons non alcoolisées

Ceci est une copie du Journal Officiel de la RCI réalisée par ERIS – infos@eris-ci.com CO PI E REPUBLIQUE DE COTE D'IVOIRE TRENTE ET UNIEME ANNEE. - W 14 UNION - DISCIPLINE - TRAVAIL JEUDI 13 AVRIL 1989 J URNAL 0 I IEL DE LA REPUBLIQUE DE COTE D'IVOIRE EDITION LOIS ET ACTES REGLEMENTAIRES paraissant Ie jeudi de chaque semaine ABONNEMENTS (} MODS UN AN ABONNEMk:NTS ET INSERTIONS ANNONCES ET AVIS Cdt!;! d'ivoire e, pays de la CAPTEAO : voie ardine-ire. . . 10.000 19.000 voie aerienne . 15.000 26.000 ,[ranger: France el pays extcricurs Les abonnements et insenions seront adresscs au Service des Joumaux orficids de Is Repuhlique de Cote rl'lvoirc, B.P. V 70 Abidjan. La Iigne..... ..... . .... (II n'est jamais compte mains de pour les annonces). 1.500 frnncs 15,(}oo francs commuos : voie ordinaire. 12.000 22,001) Toute demande de changcmen. d'adresse dcvra Chaque annonce repetec. Moili\! prix f-- ---c 'c:occiecc'=',,';"''"'''n,,' ~"'~= ='C".·"""""=- JO'"'""·"""= II eJJ e a~s:9J1JP 'lglJ-e-e~e~LS-O!rune de 85---.Imncs-lI AUlres pays: vole ordinairc . 12.000 22.000 vaie aerienne. 18.000 34.000 Prix du numero de J'anne!! couranle 400 Prix du numero d'unc annee entericurc. .. 500 Par la peste : mnjoration de 85 F par numero, Les abonnements eI Ics IInnonccs sont payablcs d'!lvance au Service des Journaux officiels de lu Repubflque de Cote d'lvoire C.C.P. 1I542 Abidjan. Les :mnonces devront parvenir au plus lard Ie jeudi pr&:edant la date de parution du ({ J .0. )). SOMMAIRE PARTIE OFFICIELLE 1989 ACTES DU GOUVERNEMENT 1988 18 nov. MINISTERE DE LA SANTE PUBLIQUE ET m: LA POPULATION . Arrete nO 250 MSP. DSPH. fixant les normes a respecter pour la confection de cert;;unes den rees alimentaires et de boissons non alcoolisees. PARTIE NON OFFICIELLE Sous-prCfecture de Danane. - Avis d'enquetc de commodo et incommodo. Seus-prefecture de Danane. - Avis d'enquere de commodo el incommodo. SOlis-prefecture de Danane, - Avis d'cnqucte de commodo et incommodo. Conservation de la Propriete el des Droits fonciers. - Bureau d'Abidjan. - Avis de demandes d'immatriculations. Direction des Recettcs domaniales et de la Conservation fonciere. - Avis de bornage. Ministere de J'Agriculture. - Sous-direction des l\ffaires dom •. I I . d fila cs rura es. - Concessions domaniales. - Avis e demandes de concessions rurales. Avis et annonces. 117 124 124 124 124 126 126 128 PARTIE OFFICIELLE ACTES DU GOUVERNEMENT MINISTERE DE LA SANTE PUBLIQUE ET DE LA POPULATION ARRETE n 0 250 MSP. DSPH du 18 novembre 1988 MSP. DSPH fixanl les normes Ii respecler pour fa confection de certaines denrf?es alimentaires et de boissons nOn almalisees. LE MINISTRE DE LA SANTE PUBLIQUE ET DE LA POPULATION, Vu Ie dcerct nO 88~799 du 6octobre 1988 portant nomination des rnernbres du Gouvemement ; Vu Ie deeret n° 84z 721 du 30 rnai 1984 portant attributions tlu ministre de la Sante publique et de 1a Population; Vu Ie deeret n° 84-947 du 3 aout 1984 modifiantle deeret n° 84-722 du 30 mai 1984 portant reorganisation du ministere de 1a Sante publique et de la Population; Vu la loi n° 63-301 du 26 juin 1963 relative a 1a repression des frandes dans la vente et la fabrication des marchandises, denrees alimentaires et des produits agricoles ; Yu Ie decret n° 73·437 du ler septembre 1973 portant application de Ia Ioi n° 63-301 du 26 juin 1963 ; Vu les necessites de services, ARRETE: Article premier. - Pour etre reconnus propres a 1a consommation, les eaux minerales, les eaux de distribution, les boissons aqueuses non alcoolisees, les derives du lait, les plats cuisines et les conserves alimentaires doivent satisfaire aux criteres micro biologiques fixes au present arrete et veri fies scion les dispositions dccrites en annexe. En outre, ils doivent etre exempts de toxines et doivent etre conformes a la composition qualitative et quantitative indiquee par Ies fabricants. Ceci est une copie du Journal Officiel de la RCI réalisée par ERIS – infos@eris-ci.com CO PI E 118 JOURNAL OFFICIEL DE LA REPUBLIQUE DE COTE D"lVOIRE Art. 2. - Les eaux minerales et caux d'alirnentation humaine, les boissons aqueuses non alcoolisees ct les bois sons sucrces (Fanta, orangina! jus de fruit~ etc.) doivent satisfaire aux criteres microbiologiques suivants : Micro~orga~ nismes ae;'r; Coli/ormes Coliformes Slaphy/ococ- Salmonella Designation bies dans (ecaux par (;US aureus par dans 100 milli- par gramme gramme gramme 25 grammes metres Eaux mincraJes et eaux pour alimentation. 100 0 0 0 0 Boissons aqueuses non a1coolis'{,'ts, boissons sucrees ....... > ••••••••••• .. . ...... 100 0 0 0 0 2° La presence d'nn seul germe pathogene suffit pour declarer l'eau ou la boisson incriminee impropre ala consom maHon. Art. 3. - Les laits fermentes (yaourts, dogue,;, kefir, elc.), les fromages frais pasleurises el les domes fralches daivent satisfaire aux criteres m.icrobiologiques suivants : ~ t I Micro~orga- Acidite expri~ nismes aero- Coli/ormes J~OIiJormes Slaphylococ- Salmon.ella mee en acide Designation bies a 30" C 30" C (par ecaux (par eMS aureus dans lactique dans (par gramme) gramme) gramme) (par gramme) 25 grammes fa partie non gr-flsse ~ Laits fermentes (yaourt, degues) ..... · . 10 1 Absence Laits geJifies et laits pasteurises aromatises 10' 10 1 Absence Fromage frais pasteurise .... .. . ....... 10 1 10 Absence Creme de consommation pasteurisee ... 3.10' phosphate conditio nne 1 10 Absence 2,5 negative 10 Yrac 100 Glaces et cremes glacees ... ... . .... 3.10' 10' 1 10 Absence Caseines ct cascinales ...... 3.10~ et flore thermophile Absence 5.10' dans 0,1 g Absence Art. 4. - Les criteres microbiologiques relatifs aux vi~ndes hachees, aux viandes cuitcs, aux produits de charcu terie, aux plats cuisines sont Ics suivants : M icro~orga Coli/ormes COli/ormes Slaphylococ Anaerobies Salmonella nismes aero- suI. reduc Designation bies 30 0 C 30 0 C (par !ecaux par cus par leurs 46" C dans (par gramme) gramme) gramme gramme (par gramme) 25 grammes Viandes hachees a I'avance ou it la de mande . . . . . . . . " . . . . • • • • • • • • • 0 • · . 5.10' 10' 10' 10' (1) 30 Absence Plats cuisines it !'avance ............. (2) 3.10' 10' 10 10' 30 Absence Produits de charcuterie crus, h~khes : Soumis a dessiccation et a consom mation en I'etat . ................. 3.10' 10' 10' 5.10' 50 Absence A consommer aprcs cuisson . 3.lO' 10' 10' 10' 10' Absence Produits de salaison crus sales et ou seches tranChf$ ou non .. ........... •• " 0- (3) 3.10' 10' 10' 5.10' 50 Absence Produits de charcuterie cuirs, tr'anches Oll non, quencHes .. , (2)(3) 3.10' 10' 10 10' 30 Absence ...... " .. ... " ... " lambon cuit entier .... . ..... · . 10' 10 Absence Absence Absence Absence Potages deshydrates .. . ........ .. ." · . 3.10' 10' 10 10' 30 Absence -- .. I i I Ceci est une copie du Journal Officiel de la RCI réalisée par ERIS – infos@eris-ci.com CO PI E 13 avril 1989 JOURNAL OFFICIEL DE LA REPUBLIQUE DE COTE ITiVOIRE 119 10 Tolerance prevue en annexe comprise; 2° Pour les pates farcies du type ravioli, cannelloni, lasagne, les quenelles et les plats cuisines auxquels est incorpore du fromage. ce critere doit etre interpretc ; 3° Pour les produits de charcuterie eonditionnes sous pelliellle plastique et SOliS vide, Ie critere relatif aux micro organisme aerobies 30° C (3.10') par gramme ne s'applique qu'au stade de la fabrication (usine). Art. 5. - Les critercs microbiologiques relatifs aux produi!s de la peche ci-dessous mentionnes sont les suivants : Designation Crustaces entiers cuits n§frigeres autres que creveHes ......... •• -". > ••••••• -" •• Tous crustaccs y compris crevettes entieres cuites ou erues, congeU:s Oll surgeles, crabes ........................ , ... Crevettes cuites decortiquees, fI§frigerees et decortiquees congeiees ou surgeiees ... Coquillages bivalves et oursins pn:sentcs vivants " .......... ... " "" ....... Cuisses de grenouilles, escargots deco quilles surgelcs ou congeles " ........ Poissons tranches, panes ou non, filets de poissons frais refrigeres ..... ...... . Poissons tranches, panes ou non, filets de poissons congeies ou surgeles ..... .. Preparations A base de chair de poissons haches, crues . . " " . . . . . . . . . . . . ...... Coquilles SaintmJacques et moules pn!cuitcs Micro-orga ni."Imes aero bies 30° C (par gramme) l()' 10 1 10' l()' II)' 5.10' 10' Coli formes fiicaux (par gramme) j , 10 3.10~ pour 100 mr 10 j 10' 10 Streploco quesfecaux (par gramme) 2,5 5.10' pour 100 ml ( 1) Staphylococ cus aureus (par gramme) 10' 10' 10' 10' 10' Anaerobies suI. reduc leurs 46° C (par gramme) 2 2 10 10' W 2 10 30 Salmonella dans 25 grammes Absence dans 25 grammes Absence dans 25 grammes Absence dans 2S grammes Absence dans 25 grammcs Absence dans 1 gramme Absence dans 25 gramrnes Absence dans 25 grammes Absence dans 25 grammes Absence dans 25 gramrnes 10 Cette recherche est effectuee en cas de suspicion particuliere, seion 1es cornmemoratifs. dans 100 millilltres de melange ({ chair -liquide intcrvalvaire I). Art. 6. - Les criteres microbiologiques relatifs aux ovoproduits, patisseries et cremes patissieres sont les SUl vants : Micro-orga Cob/ormes Colt/ormes Staphylococ Anaerobies Salmonella nismes aero- sill. reduc Designation bies 30° C 30 0 C (par lecaw< cus aureus leurs 46'" C dans (par gramme) gramme) (par gramme) (par gramme) (par gramme) 25 grammes patisserie. cremes patissieres ...... 3.10' 10' j 10' 10 Absence Ovoproduits pasteurises .. " ....... ..... 10' ]0 entero~ bateries 10' - Absence Blanes d'reufs non pasteurises . ...... - - - - - Absence Ceci est une copie du Journal Officiel de la RCI réalisée par ERIS – infos@eris-ci.com CO PI E 120 JOUR"'\I <lII.lCILL DE LA RfYLHLlQUI, D[ (OTic. IYlVOIRL I J avril 1989 Art. 7. ~ Les criteres microbiologiques relati fs al1X conserves ct semi-conserves sont les suivants .-- - --.---- - .- . ---- /vlicro-orga Co/{{ormes Coli/ormes Staphy/ococ Anaerobies Salmonella !1 isrnes aero- suI. I'i?duc Designation hies 30° C 30° C f.Oaf !ecaux (par eus aureus leurs 46" C dans (par gramme) gramme) gramme) (par gramme) (par gramme) 25 grammes Conserves or semi-conserves pas teurisee;; (!) .. . ...... 10" Absence Absence Ab:;ence I Absence Absence Semi-conserves pasteurisees (i) IQ-' Absence Absence Absence ! Absence Absence - -- -- -- - - ' 1 <:) Revivification de 1a suspension mere pendant deux hcures a 1a temperature du laboratoire pour Ies semi-conserves pastcurisees et pendant trente a quarante-cinq minute:, pour les semi-conserves non pasteurisees. Art. 8. - L'inspection des etablissements fabricants de produits vises a Particle premier du present arrete est effec tuee par la direction des Services pharmaceutiqucs et 1'1nsti tur d'Hygiene qui peuvent recourir au Laboratoire national de la Sante publique, au Laboratoire de Nutrition et de Die ~~tique de l'InstilUl nat.ional de la Same pubHque, au labo .~.toire de l'lnstitut d'Hygiene et. a tout autre laborawirc competent pour Ie cantIole analytique effectif des nonnes precitees. A Poccasion des visites d'inspection, les responsables Jc ces etablissements sont tenus de presenter aux tnspecteurs, Ies resultats de controle de qualite des produits vises a l'article premier du present arrete. Art. 9,- Les conclusions des rapports d'inspection seront, Ie cas echeam, transmises aux differcnts ministeres dont rele vent les statuts des etabJissements concernes. Art. 10. - Lc non respect des normes fixees dans Ie pre sent arrete expose Petablissemem concernc aux sanctions pre vues par la 10; nO 63-301 du 26 juin 1963 et par 10 deerel n" 73-437 du 1" septembre 1973. Art. 1 J. - La direction des Services pharmaccutiques et l'lnstitut d'Hygiene sont charges de veiller a I'application du present arrete qui sera public au Journal officiel de la Repu blique de Cote d'lvoire. Abidjan, Ie 18 novembre 1988. AJphoJlSC DJEDJE MADY. ANNEXE it ('arrete n" 250 du 18 novembre 1988 i\1SP. D.,)·PH. FY.({fl[ les flor mes a respecler pour /a con/eCliofl de cenaines denn}es a/imen faires ei de ooissons non aJcoo/isees. ObservOlions : a) Lcs rcsuitals des denornbrements doivent ttre rap· pones au gramme au au miltilitrc. En cas de recherche, Ie poids ou Ie volume d'ino\.:ulurn doir etre precise; 0) Les valeurs indiquccs dans Jes rabkaux c!u prese::1t arrete c()r rcspondent aux niycaux de contamina1iop. rnicrobienne 00 il est habi tue! d'artendre des produits fabriques, transportes et distribues dans des conditions de boones pra[iques professionnelJes en matiere d'hygiene ; c) ~lalgre les cOmraillleS lice:, en rmrticulier a la divcrsire des fabri cat tons dans none pays, il a ete [ell11 Ie plus grand comple posslble dans 1a presentc annexc de l'esprir des travaux menes actuel!emem au ::;cin des insrances intemationates dans les domaines de I'echan tillonnage el de I'interpretation des resuhats, notamment quant aux modalitcs d'intcrprctation des rcsultats d'analyses microblologiques, dans Ie but d'eviter que des conclusions non justifiees ne soiem tirees des resuhals obtenus ; el) En milieu solide les denombrements donnant un nombre de colonies inferieur it 10 ne peuvent conduire qu'a tine approxima" tion numerique de la contamination d'un gramme de produiL Dans ce cas, i1 convicnt d'cxprimcr Ie nombrc de colonies observees pour I 'inoelilum-n!el-lement-uti-lisci;-' -:-,--------------- + e) Afin d'ameIiorer la fiabilire des resultats, il est recommancle d'u[ilisel' les milieux complcts deshydratcs ou des compos ants de base des hydrates (;'[ de suivre scrupuleusemem Jes prescriptions du fabricant. 10 Echan(iilon pour /aboralOire el technique de prise d'essui 1.1. . Echantillon pour laborawire : La taiHe de l'echamillon pour laborawire d'un produit de meme nature doit etre comprise comme suit: Portions unitaires de viande et denrecs visees aux articles 2 et 3, tant au niveau de 1a fabrication que des points de vente; S1 possible au mOlns cinq unItes; Conserves: cinq unites; Coquillages: Hombre suffisant pour obtenir au laboratoire ('inq fois au moins 25 gramrnes de chair et de liquide intervalvaire. Il est a noter que Ic laboratoirc doit disposer, pour conduire les analyses completes, d'environ 500 grammes de produits, soit cinq fois 100 grammes. ees JOO grammes peuvent etre fournis par une ou plusieurs pieces. Cas particulier : !..ofsqu'jl s'agit d'une production artlsanale pour !aquefle Ie pre levemcnt de cinq ecltantiIlons rem s'averer trop im, -ortant au regard de ia quantite fahriquee, it pourra etre pTocedc a un etalement dans Ie temps de la prise d;: ces echanldlons. 1.2. - Technique de prise d'essai ; La prise d'cssai deslinee a In preparation de la sllspension mere c[ des dilmions de'imalc:s pone: . Sur lcs parties superfidel;es er profondes, llotamment pour les produit<; en tranche, haches ou divises, ains! que les plats cuisj~ nes a !'avance ; Sur la panic profondc du prodult pom Ies viandes (pieces), IC5 produl[<; de charcuterie (pieces) et !es poissons entiers, apn::s cau te::-isation de la surface; Pf)Uf Ies produirs laltiers et seIon la nature des produits, elle pone sur Ie produit homoge~lei::;t au sur ks parties superfi cielles et profondes. Ceci est une copie du Journal Officiel de la RCI réalisée par ERIS – infos@eris-ci.com CO PI E 13 avril 1989 JOt;RI'AL OFF.ICII'L DE LA REPUBLIQUE DE COTE D-IVOIRE 121 Dans Ie cas d'examcns mrcrobiotogiques, it la suile de toxi infections alimentaires, il est necessaire de pra[iquer 1a recherche des germes pathogenes toxicogenes et ou de Jeurs toxines aussi bien en surface qu'cn profondcur. 2° Inierpretation des resu/tals Remarque. -- n convient de retenir que la valeur des methodes de denombrement microbien n'est pas absolue, queUe que soit la nature des milieux de culture utilises. II est gcneraicmem admis que la variabilite peut atteindre 1/2 log. avec les milieux solides et 1 log. avec les milieux liquides. 2.1. - Plan a trois: classes Principcs : Ce plan es[ ainsi designe patTe que les resultms des examens inter pn!tes sur cette base permettent de flxer trois classes de contanti nalion: Celle infcricurc on cgale au critere: m ; Celie comprise entre le critere m et Ie senil :vI ; Celie superieure au scuil M ; m : critere fixe au present arrete. Tous les resultats egaux ou inferieurs sont consideres comme satisfaisants ; Nt: scuirImme d-<Jacceptat5iTifc, au-dill duquelles rcsu tats ne sonl plus considenSs cornme satisfaisams, sans que pour autant Ie produit soil cansidere comme toxique. Les valeurs de M sont fixees a : . M = 10 m lors du denombrcmcnl cffcctue en milieu solide ; .- M = 30 m lors du denombrement effccme en milieu Jiquide; n : nombre d'unites cornposant !'cchantillon ; C : nombrc d'unites de l'cchantillon donnant de.'; va leurs siluecs entre m ct M. Arplication pratique ([errant compte des variations liees a la tech nique microbiotogique, remarque supra) : a) La quaJite dlliot est consideree comme s3tisfaisantc ou accep table en application de l'article premier du present arrete iorsque, aucun rcsultat ne dcpasse M Les valeurs observees sont ~ 3 m Lors d'emploi de milieu solide ~ 10 m lors d'cmplol de milieu liquide . Quaiite sarisfaisante Les valeLlfs observees sont comprises: Entre 3 r.1 et 10 m (= M) en milieu soUcie j Entre 10 m ct 30 m (= M) en milieu liquide c et - t'st ~ 2/5 avec Ie plan n = 5 et e = 2 n quali[e acceptable (au tout autre plan d'efficacitc cqui valcme ou superieure). b) lC5 re!;uita1:s sont consideres cornrne non satisfaisants Lorsque les vakurs observees sam cOH"Iprises Entre 3 m et 10 m en milieu solide ; Entre 3 m et 10 m ( = M) en milieu solide c Cl- s;,;2/5. n , Dans tous les cas Oll les valeurs supcrieures a M som: obser. v~ .. ~e~ndant, Ie seuil de depassement pour Jes micro-organismes ~e,robles a + 30" C, alars que les aUlres crjU~res sont respecics, dait laIrc.I'objet d'une interpretation, nOlamment pour :cs viandcs, votallles et produits crus. Lorsque les va!curs sont superieures it M, les resultals sont consideres comme 110n salisfaisants. Mais il est bien evident qu'au dcla d'un ccrtain ordre de grandeur, la notion de toxicite s'impose de plus en plus: en tOi.!t etat de cause, Ie produit dojt etre considere comme wxique ou corrompu lorsque 1a contamination atteit1l1a valcllf microbienne Iimire S qui est fixee dans Ie cas general it 10'. LC$ 101e~ances liccs aux techniques d'analyses ne sont pas appllca hIes aux vaJeurs de TVI et de S. 2.2. - Plan a deux classes . Ce plan est ainsi designc car les resulta[s des examens interpn!!cs sur .::ette base permettem de determiner seulement deux classes de contamination. Ce type de plan, qui n'accepte aucune tolerance, meme de caractere analytique, correspond Ie plus sou vent aux expressions : {( Absence dans ) : le-resultal est (;onstdere comme satisfaisant ; « Presence dans » : Ie resultat est considere comme non satisfai sarli; lc p~·oduit est declare impropre it la consommation, En outre, dans certains cas particuJiers mentionnes aux articles 2 et 5 du present arrete, it est fait application du plan a deux classes, avec la tolerance analytique. Nola. - Cc plan est en particulicr applicable aux contaminations par salmonc1k:. Cep~ndam, pour lcs voJaillcs,lO!'squ'il s'agil de contaminar]on superficielle, Ie 1o .. est considcre commc satisfaisant lorsque Ie rapport d ..;;; 1/5, Clam Ie nombre d'unitcs de !'cchanlillon donI Ics rcsllltats sonr n pOSL[ifs. 2.3. - Cas parliculier des conserves: Lorsque les conserves a base de denrt~es animares ou d'origine animalc nc repondcnt pas aux epreuves de slabilitc fixecs a !'ani de 7 du presem alTere la transposilion au lot d'origine ne pOU~fa intervenir Que dans ]a mesure ou un pian d'6;hantillonnage preaa lablemem defini aura etc mis en oeuvre. 3 ° Dispositions partieuiferes relatives aux echantillons soumis a fa congelation en vue d'une analyse microbi%gique dijjeriie Rernarque. -- La congelation d'llH echantillon (plat cuisine, viande hacb~c) ... provoque une dlminution plus au moins scnsible, selon Ie cas, du oombre de germes servant de test pour le jugemenr de la qualit.e rnicrobiologiqut' telle que dennie par la reglernenta tion en vigueur. Le fait de congeier un echantiHon d'un produit refrigere peut etre de nature a pro\'oquer certains litiges (e::hantillon refrigere juge inac ceptable, alors qll'un cchamillon du mcmc lot, mais ayant subi une congelation, Se revek saci:sra~sant an plan bacteriologique). II convient, pour eviter au maximum t'apparition de cette disparile, dt: traiter !es echanlillons dans lcs conditions 5uivantes, lorsqu'ils devront etre congelcs el conserves en I'eta:.:, prcalablcmcm it ICJ;r analyse bac\.eriologique. 3.1. - Modaliti:s de congClmion e[ de decongelation a) Conge!at~on precoce ccn.:-luite de mnniere it atleindre la tem perature de 10° C k plus raplt!.ement po:,:.ib1e ; b) 5LOckagc ct transpon a Hoe temperature ~ - 18° C. La duree de swckage ne cloit pas cxceder un mois ; c) Dccongclation rapide a l'air ambiant ~ une temperature de I'ordre de 20° C pendant Ie temps Ie plus court possible (inferieur .{ ltois hellres) sans depasser Ie stade 01; la consistance du produit per me! Ie prelcvement necessairc a la preparation de la suspension mei·e nemperature voi.~ille de DC C). Ceci est une copie du Journal Officiel de la RCI réalisée par ERIS – infos@eris-ci.com CO PI E 122 JOURNAL OFFJeIEL DE LA REPUBLIQUE DE COTE O'IVOIRE 13 avril 1989 ANNEXE II METHODES GENERALES D' ANALYSES BACTERIOLOGlQUES 1 <I Preparalion de IJechantillon pour essai. - Prise d'essai Chaque fois qu'ij est necessaire, il est procede it une homogenei sation du produit it I'aide de technique et d'apparcils appropries (broyeur-homogeneisateur par exemple). Les prises d'essai soot effectuees sur l'echantillon homogimeise en tenant compte de la nature des produits et des operations analy tiques a conduire. Hies sont en principe de 10, 25 ou 50 grammes (dans ce dernier cas, 25 grarnmes sont reserves a la recherche des salrnoneHes). 2" Suspensions meres et dilutions decimates Dans un flacon contenant 90, tOO ou 125 millilitres de diluant, introduire asseptiquement 10 ou 25 grammes de produit afin de rca User des suspensions au 1/5 ou 1110. Homogeneises. Les diluants suivants sont preconises : 2.1. - Cas general: Tryptone sci : "rryptone ........... , , ......... . Chlorure de sodium .. Eau dislillee .............. . Preparation: 1 g 8,5 g 1000 ml Chauffer lentement jusqu'a complete dissolmion, ajuster si neces salre Ie PH it 7,0 (± 0,1), repartir puis steriliser vingt minutes a 121°C±1. Eau peptonnee tampon nee : Bacto peptone .. Chlorure de sodium ................. . Phosphate disodique ..... Phosphate monopotassiquc ... Eau distillee " 20 g 5 g 9g 1,5 g 1000 ml Steriliser a 121 "C ± I pendant vingl minutes. pH !inal ; 7,2. 2.2. - Cas des produits laitiers . Eau peptonnee pour Ie yaourt ; Tryptone-se! pour les laits gelifies el empresu[(!s, Phosphate dipotassique a 2 p. 100 pH final entre 7,4 et 7,6 pour les cremes frakhes, les framages frais et les caseinates. A partir des suspensions meres, preparer les dilutions dccimales en utilisant Ie diluant correspondanl. 3 ° Rectification A I'exclusion des produits laitiers, 5i Ie produit a subi un traitem mem thermique ou s'il a ete congele ou encore s'il renferme des sels pouvant exercer une action inhlbitrice (Na No 3, NaNo 2) ... apres homogeneisation, laisser Ie flacon a la temperature du laboratoirc (200 C ± 2{1 C) pendant trente a quarante-cinq minutes (optimum quarante minutes). 4° Denombrement des micro-organismes aerobies iJ 30" C Porter en double I millilitre de l'echantillon pour essai s'il est liquide ou 1 millilitre de suspension mere dans Ie cas des aut res pro duits, dans des boites de Petri steriles (90 a 100 millimetres de dia~ metre). Pratiquer de la meme maniere a partir des dilutions rete~ nues en foncHon du produit a analyser. Couler dans chaque bo'ite 15 millilitres de gelose pour denom~ brement pfealablemem fondue et ramenee a 47° C (+ 10 C). Bien meianger inoculum et milieu. L 'ensemble de ces operations ne doit pas durer plus de quinze minutes. Nota. - n est indispensable d' employer des pipettes sterilcs changees pour chaque dilution et d'homogeneiser a I'aide d'un agitateur pour tubes a essai Placer les boites retournees dans une etuve a 30'" C (± I" C). Les laisser soixante-douze hemes (± trois heures). Ne rcrenar pour Ie denombrement que ies boites contenant moins de 300 colonies (et plus de 30 51 possible). 5° Denombrement des interobacteriaceses Le denombrement s'effectue en gelose au crista! violet, rouge "eutre, bile, glucose (V.R.B.G.). A partir du flacon contenant la suspension mere (l/5 ou 1/10) porter 1 millilitre dans une bOlte de Petri sterile (90 Ii 100 miHi metres de diametre). Faire I'essai en double. Couler 12/13 millilitre de gelose selective fondue et ramenec a 47° C (± 10 C). Bien melanger inoculum et milieu. Laisser solidi~ fier. Couler en surface environ 9 miltilitres de milieu selectif vierge ramcne a 47° C (± 10 C). Les laisser vingtmquatre heures (± deux heures). Denombrer les colonies {k:s ent~robac~ tt:ries sont oxydases et fermentent Ie glucose},". -j 6 0 Denombrement des coli/ormes Les coliformes sont denombrees, SOil en milieu solide (gelose desQxycholate lactose), soit en milieu liquide par la technique du nombre Ie plus probable (N.P.P.) a l'aide du bouillon lactose bilie au vert brillant n:~parti dans des tubes contenant des cloches de Durham (10 millilitres de bouillon par tube). 6.1. - Le denombrement en milieu solide s'effectue a partir du produit s'il est liquide, des suspensions meres dans les autrcs cas et des dilutions decimaJes retenues selon la nature du produit en portam I millililre dans une boite de Petri sterile (90 - 100 milli metres de diametre). Realiser chaque encemencement en double. Couler cnsuite 13 millilitres environ de gelose desoxycho!ate lac~ tose fondue et ramenee a 47° C (± 10 C). Bien melanger inoculum et milieu. Laisser solidifier. Recouvrir d'une cOliche de gelose desoxycholate lactose vierge (9 millilitres environ), laisser solidificr. Porter les bOltes retournees a I'ctuve a 30° C. Les laisscr vingt quatre heures (± d.eux heures). Dcnombrer [es colonies caracteristiques rouge fonce! d'un diametre superieur a 0,5 millimetre en prenam si possible une serie de deux boites ou Ie nombre est compris entre 15 et 150. 6.2. - Le denombrement en milieu liquide s'effectue en triple essal en transferant dans chaque tube de milieu selectif I millilitre du produit 5'il est liquide ou de la suspension mere puis en operant de la me-me maniere pour les dilutions suivantes . Porter les tubes a l'etuve a 300 C (± 10 C). Les laisser vingt~ quatre quarante-huit heures (± deux heures) ; Pour chaque dilution (y compris suspension mere et produit Jiquide) compter les tubes positifs, c'est-a-dire ceux qui presentent un degagement gazeux dans la cloche de Durham et calculer le nom bre Ie plus probable a Paide des tables de reference. 7° Denombrement des coli/ormes !ecaux Enterobacteries permettant Je lactose aux temperatures elev~s. II s'effectue : Soit en milieu solide, selon ies memes modalites que pour les coliformes mais portant les boTtes de Petri ense mencees a + 440 C (± 0,5 0 C) durant vingt~quatre heures (± deux heures) • ... Ceci est une copie du Journal Officiel de la RCI réalisée par ERIS – infos@eris-ci.com CO PI E 13 avril 1989 JOURNAL OFFICIEl DE LA REI'UBLIQUE DE COTE 1YIVOIRE 123 Soit en milieu liquide (technique du N.P.P.) en repiquant a I'aide d'une anse bouch;~e les tubes de bouillon lactose bile au vert brillant trouves positifs lars du denombrement des coli formes, dans des tubes de ce rneme bouillon. Les tubes cnscmcnces sont incubes en bain d'eau a 44 0 c (± 0,5 0 C) vingt-quatre - quarante-huit heures (± deux hcures). Compter les tubes positifs, c'cst-a-dire ceux presentant un dega gement gazeux dans les cloches de Durham et calculer Ie nombre Ie plus probable a l'aide des tables de reference. 8 <;I Denombrement de staphylococcus aureus A partir du produit, s'il est liquide, de la suspension mere et/ou des dilutions retenues selon la nature du produit, porter 0,1 milli litre sur une boite de Petri contenant du milieu de Baird Parker et etaler I'inoculum a I'aide d'un etaleur de verre sur la surface prea lablement sechee du milieu. Ce dernier ne doit pas avoir plus de quarante-huit heures et do it etre conserve au froid. Effectuer cha que enscmenccrncnt en double. Pour les produits iaitiers, ense mencer 1 rnillilitre en milieu de Baird Parker. Les boltes sont incubees a I'etuve it 37° C (± ]" C) pendant vingt • atre puis quarante-huit heures. Denombr-er-ies-colonies-caracteristiques-;-c'-est::a-::-dire-nolres-;-brH~ lantes d'un diametrc compris entre 0,5 et 2 millimetres, presentant un liscn.~ blanc opaque, entourees d'une aureole d'cclaircissement du milieu. Certains staphylocoqucs retrouves dans les produits lai~ tiers peuvent donner des colonies dcpourvues d'aureole. Repiquer au moins cinq colonies pour les soumeHre au test de 1a coagulase ou de la thermonuclease. En cas d'expertise, sc conformer aux indications de Ja norme AFNOR V OS-OI4. 9" Denombrement des anaerobies suljito-rf?ducfeurs d (46 D C) Ce denombrement peut s'effectuer en milieu S.P.S., T.S.N. ou T.S.C. (tryptone sulfite cycloserine), ce dernicr milieu Hant recommande. En raison de sa relative nouveaute, sa composition est rappciee ci-apres : Preparation du milieu base : Tryptone ........... ............ . Soytone ..... . Extrait de Ievurc ... " Met.bisulfite de sodium anhydre (SZ Os NaZ) Citrate de fer ammoniacal: Agar-agar. . ... > • •••• , Eau "'" .. " 15 g 5 g 5 g 1 g 12 Ii 18 g 1 000 mil Ajuster Ie pH de sorte qu'apres sterilisation, il soit a 7,6 ± 0,1 a 25° c. Repartir en tube de 20 X 200 a raison de 19 millilitres par tube. Steriliser quinze minutes a 121 0 C ± I <I C. Conserver a 45 0 C au maximum quinzc jours. Solutions de D cycloserine: D cycloserine cristallisee fau ." 4g 100 mil Dissoudre la cycloserine dans ['eau, steriliser par filtrat.ion. Preparation du milieu complel. Au moment de I'emploi, ajouter la solution de D cycloserine pour ~btenir une concentration finale de 4oo/1g/millilitre, soit I milli ht.re pour 100 millilitres de milieu, soit 0,20 millilitre pour 20 milli mitres ou 0,25 millilitre pour 25 millilitres de milieu. 10 0 Denombrement des Sfreptocoques !ecaux (ne concerne que fes produits de fa peche) II s'effectue en milieu liquide par la technique du nombre le plus probable (N.P.P.). Ensemencer chaque tube de 10 miHilitres de milieu de tothe avec 1 mi!iilitre de suspension mere au des differentes dilutions au 1/20 t 1/200, 1/2000 (ensemencer trois tubes par dilution). Faire incuber les tubes a 37° C (± J ° C) vingt-quatre quarante-huit heures. Repiquer lcs tubes positifs, c'est-a-dire ceux montant une crois sance bacterienne. dans des tubes con tenant du milieu de lilsky (une anse boudee). Faire incuber les lubes it 37<' C (± 10 C) vingtzquatre quarante-huit heures. Compter les tubes positifs (troubles etlou avec pastille violette au fond des tubes) pour chaque dilution et ca1culer Ie N.P.P. en utilisant les tables de reference . Recherche de salmonella En cas d'expertise se conformer aux indications de la norme AFNOR V 08-13. Dans Ies autres cas, utiliscr la technique suivante : Preenrichissement : s' effectue en eau peptonee tamponnee (voir annexe 2, 2. I), pendant quatre heures a 37° C (± 10 C) pour res ovoproduits ct ceux dont la teneur microbienne . initiaIe est presumee importante, et pendant seize it vingt heures a 37 0 C (± I <I C) dans les autres cas. Le rapport entre Ia prise d'essai ct Ie volume du milieu doit elre II 10. Enrichissement ; it partir du milieu de precnrichissement, porter 1 milIilitre dans 10 rnillilitres de tetrathionate de Na et vert brillant (T. V.B.) et ! millilitre dans 10 milliIitres de bouillon en seU:nite de Na. Faire incuber a 37" C (± 10 C) pendant vingt~quatrc heures. Isolement ; apres vingtzquatre heures et eventueHement quarante huit heures d'incubation effectuer, a partir des milieux d'enrichis~ sement, des isolements a la surface d'un deuxieme milieu seiectif. Faire incuber les boites a 37" C (± 10 C) pendant vingt heures (± deux heures). SI Ie dcveloppement cst insuffisant, poursuivre I'incubation. S'il y a presence de colonies caracteristiques ou dou tcuses, en repiquer un nombre suffisant et les soumettre aUK essais biochimiques classiques. Nota:· Dans I'(':ventualite ou l'analyse porte sur de nombreux echantillons d'un meme lot, une technique simplifiee peut etre mise en ceuvre. BIle com porte : Preenrichissement (sans changement) ; Enrichissement : Un tube de bouillon tetrathionatc incubi: it 43" C (± 0,5 0 C). lsolement : Sur gelose au vert briHant et rouge de phenol seulement. •