Arrêté interministériel n°196 MSPS/MINAGRA/MIC du 03 août 1993 relatif aux méthodes de prélèvement et de contrôle bactériologique des glaces et crèmes

Ceci est une copie du Journal Officiel de la RCI realisee par ERIS - infos@eris-ci.com '-(--.~;-~~~~~~:~~,,~.~,~,~,~,~,~.~~~J~'O~U~R~N;A~~~O~,P~,R~·C;"ffi~",~~C~D~E~'~~~:~R~~~P~UB~·~U~·Q~gE~P~E~-C~'~a~I~E~D~'N~o~m~E~~~~~.~)8~'~ij~OV~em~bre~1~~3~ c I I 1 c MINISTERE DF; LA-SANTE ET DE LA PROTECTION SOCIALE ARRETEINJ"ERMINISTERIELnO 196MSPS.IMINAGRAJMIC. du 3 aOal 1993 relatif aux mel/lOdes de preleveiirenl el de cOnlrtJle bacl/!riologique des glaces el cremes glacees .. I.E MINlSTRB DE LA SANlE ET DE LA PR01ECTION SOClALB ; I.E MlNISTRB DEL'AGRICUL TURE BT DES RESSOURCES ANlMALEs ; I.E MINlSTRB DE L'INDUSTRJE ET DU COMMERCE, Vu la loi n° 63·301 du 26 juin 1963 relative a 1. rep;es'ion des fraudes dans ]a vente des marchandises et des' felsifications ' des denrees alimentaires et pr~uits agricol~s 1 V:u Ie decret nO 834108 du 3 ",?Qt, 1983. portant appli""uop de I. loi nO 63·301 du ·26 juin 1963 relative li la rtpIl\ssion des frau.des en ce qui conceme la f~bricatioD et"la'cbnime'rcialiSati6n des"produits . Thitiers ; Vu Ie d'ecret nO 91·755 du 14 nove,!,bre,I991 portant nomination .s membres du Gouvernem~nt ; , ,Vu Ie decret nO 91·806 du 11 decemb,re,I991 po!);lnt attri\Jutions des membres du Gouvernement ;" . .' . Vu l'arrete n° 250 du 18 novemb~e 198:~' ri~~rii r~ \io~es : a respecter pour Ia oonfectlon de certaines" dcnrees ':alimentaires ct d~ bois sons non alcoolisks. . .. ' . ARREIENT: '. ,:.' •• f. Article premier. - Les' laborat<ilres officiellf des 'ininis~res : charges de la Sante, des Ressources animales et du Cornmetce. ; ainsi que les laboratoires agrees IrOur .Ie. cQlltrflle. des Jaits et, produits laitiers sont tenus d'employer., en applicatioJ.l de l'article 71 du deeret nO 83·808 du 3 aout i983; les'mW!odes d6crites' en annexe pour Ie P~~lev~inent et Ie ·contrCile bact6:iologiqu~ des glaces et cremes"g~acees~. ' " ! Art. 2. - Les criteres microbiologiques des glaces'et'creriles' glacees tels que. fix6s a l'article,,3 de l'arrete UO 250,du 18 novembre 1988 sout modifies co~e suit: ' , Microorganismes a6:obies a 30°Cfg, .......... ,.. 3 a 10' Coliformes a 30°C/g ....... ' .......... :...... . 10' , '-Qolifonnes f&:aux a 44°C/g ...... "" .,: <. , •••• Staphylococcus aureusfg ........ : . . . . . . . . . • . . . 10 Salmonella dans 25 grammes ............. ': ... absence La d&ermination de ces criteres est effecLUi!e cOnformement aux· dispositions de l'annexe du present arret6.· , Art. 3. - Le directeur general de' la Sante et de Ia Protection sociale, Ie directeur general des Ressources animaies et Ie directeur de Ia Repression des Fraudes et du ContrCile de Ia QU'llite sont charges de r~xecution du 'present ,arrete qui sera publi6 au Journal officiel de la Mpublique de CCite d'Ivoire. Abidjan, Ie 3 aoO! 1993. U m.inislr~ de /a SanJ~ d deUr PllJtec.t;on sociale. Prafes-sew Alaill EKAA, u tninistu de l'Agriculture et du RU.fDJlrcc animates. M.l.amben KOUASSI KONAN. U. minislre de l'lruilUtrie et du ColJ1111t!rce, M. Ferdinand KACOU ANGORA. ANNEXE • d I'arrete inJerminioltfriel nO 196 MSPS.lM1NAGRAlMIC. du , 3 aoal 1993 relalif au:< mtl/wties de prel,.vemenJ el de contrOl. bacre,iologique des glaces'l c~mes glacies. , ..... I. - PRELEVEMENT DES GLACESP CREMES GLACEES A. - MA 1ERffiL A UTIUSER Recipients neutres, ste.rilisables au a usage unique- ; Cumores a long mancbe, spatule" sondes ~ usage unique ou sttrillsables : Pour Ie transpol~ les r€cipients,contenant Ie. ecbantillons doivent eire places dans une bolte isothexme ~pipee ~ fa~on a maintenir les p~duits congeles jusqu'a. rarri;6e au·labQratorre. .. . B. -1ECHNIQ1JES DE P~ELEVEMEN:I' . , . 10 Le laboratoire doit disposer po.ur c~mduire Ies analyses completes d'environ 500 grammes de praGnit, soit cinq fois 100 ·grammes. Ces 100 grammes peuvent atfe fourbis par·une· au plusieurs pieces; ,1' •• .: 2° Les pre}eyements doivent Glee. fBti.t~ ~elan l~ ~chJlJques suiyantes en respectant Ies pr6cautions d'.us~gc eQfbacteriolo<gi~ : ,:1.; ,.. . .' . I.es glaces et creIl)~s, gl.c~s conditionnees en emballage iDdividuei doiv~t ~:fue pr6Iev'6es" et ti-aftShuses:: au:' b.b6ral(f1i:i·(Jans leur emballage d'origine en conservant .Ie regime de IcoIJgelation j.u~q~·au moment de l'analyse : "";;::'.' ." ,. . .. ': ' ... :. ~ Pour Ies glaces et ~remes gl:~7.~.fc~j~ . .il}~.;c~i;l~~r~ ou vendues au moyen d'appareil distnbuteur, pr61ever I ecbantillon ~ians lcs conditions de ve'nte et"sBus 1'8· forin'e liabituelle' ~e presentation du produit a~ co~mma~.; .... ..:. ',~ , . Pour Ies gHlces multic;quch~s,!:glact;S. pndulees .• glace~ . contenant des noix,. des fruits, des morce!lUX de ~hocolat. etc ... , .' runite d'echantillonnage doit etre' i~pfesentec par l'unit6"compiete : offerte A la vente; , ,- Pour les gloees et 'cremes glac,~ ven~~s au demi·litto'ou au,litre : pr6Iever l'unite de ve.nte : ' ~ Dans Ie cas des prnductions arti~anales, up echanlill9n de 100 grammes sera prelev6. Si' apres analyse les resuitats ne so~t p~ satisf~antsl un deuxicme prelevement de 500 grammes sera effeetut": " " , ' ." ..... II. -ANALYSE BACrnRIOLOGIQUE DES GLACES ET CREMES GLA:CEES' " . A. - MlllEUX DE CULWRE ET D1l.UANT Utiliser pour la preparation du dilu·~t· et dei n:iilihux de culture, deS Composants de base deshydrates, au une preparation complete deshydratee. Les prescriptions du fabr~cant. doivent cue suivies scIllpuleusement. Los produits chimiques doivetit eire de qUi!lM .nalytiq~e. Veau utilisee doit eire disti1lee ou demmeralisec et exempte de substances susceptibl~ d'inbiber Ia croissance des' microorgan~es.da[ls.les conditions de l'essai. Si Ie diluant et les .nl.ilieu.x qe.cu~ture ne sOD;t pas utllis6s extempora~menf suivre les. indieations:du fabrleant. . 1" diluanJs 1.1. - Eou peptonee tamponCe : Peptone •.....•• : ............................ ~ •. 10 girunines CbIrorure de sodium ........................... .5 grammes ' Monobydrogenophospbate de sodium •.. : ..... : .... :9 grammes Dih;drOg6nopbospbate de potassium •........ : ••.... 1,5 g, " Eou distillee ......•.. : . . • . . • • . . . . . . . . . . . . .. 1 000 inillilitres Ceci est une copie du Journal Officiel de la RCI realisee par ERIS - infos@eris-ci.com 18 n<!vemo{e 1993 JOURNAL OFFICIBL DE LA REPUBUQUE DE COTE D'IVOlRE 893 "" ,~,"- , ' ". ".. '" ." . , 1.2. - Tryptone se1 : Tryptone ...•.. " ........ ,., ... "."" .. " ... ,"', 1 gramme Cblorure de sodium ,., ... ,' .... , . , , . " . , . , , ... ,: 8 grammes Ban distill6e .............................. 1 000 millilitres pH ~ 7,0 ±O,2 Dissoudre 1es composants dans reau en portant It 6bulitlon. Rcpartir ensuite les quantites de diluant necessaires pour I'exarnen dans les fioles de capacite appropriee. Sterilise, a I'autoclave a 121"C pendant 20 minutes, 2" Gelose pour dinombremem PO! Peptone ... .. .. .. .. . .. .. .. .. .. .. . . .. .. ... .. .... 5 grammes Extrait de levure ' ..... , ....... " ',: . : .......... ,2,5 g. Glucose ... , . .- .•.. ~ .. : , , , , , , , . , , , . , .. , , .... " 1 gramme Agar .......... "", .. " ...... ,, ............. 15 grammes Eau distillee : .................. " .. "...... I 000 mlllilitres pH ~7,O :1:,0,2 Dissoudre dans l'eau a ebuliti~'n"; Re~arti~ Ie milieu a raison ',; 15 "millilitres par tube a essai steriliser a l'autoclave it 121 CI C pendant 15 minutes. 3" Gelose blanclre Agar '''''''''''''''''' .. '." .. " ......... 9a 18 giammes Eau distillee """"" ..... .. " ........ I 000 millilitres 4 C1 Gelose au desorychocblate J pour 1 000 ,. PeptoDij bactmologique ......................... '10 grammes . . " . 'Chloruredesodium~ ...• " •• '.""'" ",',: ,'I \".: ••• , ,",". S grammes Phosphate.dipo~sique:" " ., .: ... '" ..... ', ... ' .:".' 2 grammes Citrate ferrique .......................... : ..... ': 1 granilne Citrate de sodium ............................ ' .. ' I gramme I...actcise. , , . , , , • , , , ... , ..• , . , . , . : :",1:. ; ::':. : .... .:; • .' 10'gratllmes Desoxycholate de sodium .......... " ......... , .. I grairune RougeneutIe .......... : .. :::::.: ... : .. ;.:., ... 0,03 g. Agar.: .............. " .. ,'.'" ..... :: ... ,':" ... ,,,. ~·3 grimmes Bau distill~ ............................ ':... I 000 miJiilitres pH~7,3±O,2 M61anger jusqu'a obt~ntion d'une suspension homogene. Faire cbauffer lentement en agitant frequemment. Puis porter .•. ebulition iusqu'" dissolution complete. Ne pas autoclaver. SCI Gelose lacrosie, biliee, cristal violet , et rouge neUlre (VRBL) Peptone bacteriologique .......... ' ....... '.' . .. " 7 'grarnmes' Extrait de levure ........ , ... , ...... : . . . . . . . . . .. 3" grammes Chlorure de sodium ............. " ........... " S granimes Sels biliaires .......................... '.. . .. ... 1,5 g. Lactose ................................ , ..... " 10 grammes Rouge neutre •... , ........... , . , ... , ....... , :. 0.03 g, Crista! violet ............................... '" 0,002 g. Agar ........ ,' ....... " ...... " .. '" . ",' . .... 11 grammcs Ban." ............. , .............. ",.;:. looomillilltres pH ~7,4 :£0,2 M6langer jusqu'a obtention d'nne suspension hom'ogene: Faire chauffer lentement en agitant frtqucmment, puis porter ('" • cbulition iusqu'. diSsolution complete. Ce milieu .pe~t eire; utilis6 des sa pIiparation ou etre st6rilise .. 1'0u1oclovo .. 110" C pendant 20 minutes. 6" BouiUon lactost! bilit! aU vert brillan1 (BUVB) 6.1. - Milieu simple concentration: Peptone bact.!riologique ... " ........... " ...... 10 grammes Bile de ba:uf. ..... " . " .... " ............. ". 20 gramm .. Lactose ...... : .. .. .. . .. . .. ... .. .. . .. .. .. .... Hi grammes Vert brillant. ............. " .......... " . .. ... . 0,0133 g. Eau . : ............. ' .......... , ............ 1 000 millilitres pH ~7,2 ±O,2 6.2. - Milieu double coucentriltion : Pepione·bacteriologique ....................... :., 20grommes Bile de ba:uf. ........ " .................. ' .. . 40grammes Lactose .................................. '" 20grammes C V~ brillant ........•......... : ............ . o,02&;g. Eau. '",'." •. " .. ,."' ... "" .. , ..• ,.,., .. t 000 miiiilitres pH. =:7,2 ±O,2 B.ie~ !n~!anger et repartir dans les tubes contenant un~ cloche de . Durham. St.!riliser' l'au1oclave a 121"C pendant 15 minutes. . . 7" Gelose Baird Parker P~pto~ •.. ': . ' ...... : ,': . : ... : ... : ...... , .•..•.. i'iigram'me. Extrait de viande de bomf .. .. .. .. .. . .. ..... . .. . ... 4 grammes . . Extraitde levu", .......................... " . .. 2 grommes ".J>yl'uvare de.sodium ............ ; c. -;.;.:., ......... .lO .. gr",!""es Cbl' """ de lith· . '5 'orure lum . , ........ , .. ', . , ...•• ,', .' • , . . ' grammes Glycocolle .................... " ....... : .... :. 12grarnmes' Agar ..... '" .............. '.' ............... 14'grammes C . '&., distill~ ................ ,' ....... :..... lOOOmilliIitres pH ~7,2 ±O,2 Meure 57 \!,aJ!IlIIes de poudre dans un litre d'eau froide. Attendre 5 minutes, puis m61anger jusqu'a obtention dluDe suspension homogene, Chauffer lentement en agitant fr6quemment, puis porter .. '6buIiaon . iUsqu'" dissolution comp!ete. Repartir iI raison de 100 millilitres par flacon. Au moment de remploi ajouter .·100 millilili'es' de· milieu rond~ et refroidi ;; 45" C - 50" C, 5 millilitres de iaune d'"",r au tellurito depotassium.et 205m! de slllfarnetba1ine.' 0,2'%. +' . Melanger soigneusement apres; chaque addition, Couler IS t 20 millilitres de milieu complet dans' des .i!o11es de Petri ~. et laisser se solidifier. . Los boltes peuvent atre conserve.., a.vant s6cbag<r viIIgt-qUJlrO hcures:" au maximum entre. 0 et + SoC. . Au moment de I'emplo~ .6cher les boltl>s, de prffitetice coiJ.verclo ( enleve et surface de ]a g6l0se 1ourii6e yen I. bes dabs ube eiuvt ou un incubaleu. regie a 50 ± I" c·pendeIii 30 minutes. '. . ( ( c Ceci est une copie du Journal Officiel de la ReI realisee par ERIS - infos@eris-ci.com JOURNAL OFFICIEL DE LA REPIIBI IQJIE DE COTE D'fV9IRE 18'novembre 1993 so Bouillon cerveaU-C(Bur Ploreose peptone ..................... , ...... , 10 grammes 'Infusion de cervelle de veaU ....• •.............•. . 12.5 g. Infusion de cceur de beeuf . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 grammes Chlorure de sodium ...•. : . , ........ ; . . . . . . . . . 5 grammes Phosphate disodique ................ , ....... , . . 2,5 g. Glucose ..... , . " , .............. , ..... '.' .. . . . . . . . 2 gramm!'S pH .= 7,4 ± 0,2 Bien m,elanger avant repartition. St6riliser Hautoelave 121 'C pendant 15 minutes. 9' Plasma de lapin lyophilisl Rehydrater Ie plasma conformement aux indications du r,bricant. 10' lIoui/lon de.Muller KauJfma!l1l MQieu d'enricbisscment au tCtrathionate et au vert briUant : P,,!,Io~e de soja ....... , ..•.... , .......... , . . . 2,3 g. Hrdrolr,t !rypsique de caseine , .•............ , , , 7 grammes Chlorure de sodium, , ................. , . . . . . .. 2S gral)l!Iles Carbonate de sodium. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. is g!"au:unes 'Tbiosnlfate de sodium, ...... , '.' ............. '. 40,7 g. Bile ~e boou!. .. , .................. , , , . . . . . . . 4,75 g. £au distill~ " .' 1"000'" un" .............................•.. m litres pH= 7,3 ±O,2 Mettre 82 gramme. de poudre d':~s un litre d'cau 'distUlee. Porter l ebulition. Ramener ~ 45°C et ajouter 19 millilitres d'une solution indo-!OOuree et 9,5 ml d'une solution de vert brillant a 0,1 %. '- Solution iodo·iodure : lode ••......... , .• , , ... , ............... : ... , 20 grammes Iodure de potassium. '. 0'. ,.~ " ••• , ••••• , , •••• : ' '., ." 2S grammes Ban distiIIee .............................. , . . .. lQO m.illilitres '-cSolutiOn de vert brillant : '. . . Vertbrjllant •....... ; ....................... , 0,5 g. . ~ distiHe. .•..•... , ........ , ...•..•.. , •.• ,. H)~ mUli.litres Bien m<llanger et repartiren tubes ou flacons de 20 miliUitres si.riles. )10 Bouillon au oreltnire cysti1fi!. . Milieu de base: Tryptone •...•••.......•.. , , , ............ '.' • . . . . . .. 5,0 g. .Lactose ............. , ...•....•... , . , ..... :: ..• " 4,0 g, Hydrogenophosphate disodique .•....•......... ; . . . .. 10,0 g. . DodOcahydrati (No,= HPO,=l2H, = 0) . . Hydrogenose~te de sodium .. '.' .• , ....•.... '.' . • . . . .. 4,0 g, Ea!i •.•••• :,.: .. "., .•• ;' .•. : ••........•.••. looo.mUlililres Dissoudre 10. trois prem'iers composants de base daris J'eau, en portant et maintenant A cbulition pendao~5 minutes. A}irnrrefroidissemont; ajoutCr I'hy~g6noselenite de .odium. SlnOcessairc, ajuster Ie pH A 7,0. .~ Solution: de L:Cysfuie : L.Cystine •.....• , ...• , •...................•• 0,1 g. S'" " '. .'. . . ol~!i.0~ !\,\>y~xyde de sodIUm ... , , .... ; . " •.... . " i5 millililres C (NaoH) = I molJ!: « Solution IN. Completer ill00 millililres dans une fiole sterile avec de reau sterile. Ne pas stCriliser. Milieu complet : Milieu d~ base .... , , .......... , ... , , , . . . . . .. I 000 millilitres Solution! de L cystine .. , .... , . , .......... , . . . . 10 millilitres Refroidir Ie milieu de base et ajouter sterilemcnt la solution de L. Cystine. . Si n~essairc. ajouter Ie pH a 7,0 Repartir st6rilement Ie milieu par quantit6s necessalres par l'examen dans des flacons sreriles d. capacite adequate. Utiliser Ie milieu le'jour de sa preparation. , 120 Bouillon rappaport~vassmadis au vert !JU11achite er au ch/oTlLTe de magnesium. Solution A : Tryptone •.. , ........ ' ............ , •....... , ... 5,0 g. , . . Chlorue de sodium ............ , , .. . . . . . . . . . . . .. 8,0 g, Dihydrogenopbosplate de potassium (KH, = PO,) .... 1,6 g. Eau .. ',' . , :, •.... : ... , .... , ".: .. '.. .... '.' .. :. I 000 mlllililres Dissoudre les composants dans l'eau en cbauffant a.70°C. La solution doit etre prepare. I. jonr meme de.!, preparation du milieu rapp'port vassiliadis. Solution B : ,II: : ;,' ','. ! Sextahydratc de chlorure de magnesium .... : .. . 4Oo,Og. (mg CJ, = 6H, 0) £au .......... . . . .• , . . . . . . • . . . . . . , . •. . . . .• 1 000 millilres Dissoudre Ie chlorure de magnesium dans: reau. La solution peut etre conserve. dans un ·flacon de verre brun,.a I, temperature ambiante. soIuUonC: Oxalate de vert'de' malachite ............. , . . . . . . 9,4 g .. Eau ......................... ,............ I 000 millilres Dissoudre I'oxalate de vert malachiedans reau. ~. solution peut stre. cODservee dans un flacon d.e verre brun a lempm-atute ambiante, .Milieu complet ; Solution A ... " .............. , ....•..... ,.. I 000 millilitres Solution B ....... ,., .....•............ : .. ".. 100 millililres SoIutionC ....................... ,. :, .....••. 10millilitres Ajouter a 1 OOOmUlililres de solutionA ; 100 millilitr"-j de solution B et 10 millilitres de solutions C. Si neeessaire, 'juster Ie pH de sorle qu'apres sterilisation, il soit de 5,2 . ·R~p,;ro.. des tubes iI essai par quantite. de 20 millilitres. St6riliser alls"C pendant 15 minutes. Conserver Ie milieu Binsi prepare au refrigerateur. 13" Gelose au vert brUlant et au rouge de pMnol (Edel et kampelmDcher). Extrail de viande <!e boouf deshydrati ..•.•••. , , . . .. 4 grammes Pepl9ile pancreatique d. caseine ... '. , , ..••..••... 10 grammes J>xtrait de levure .... , . . . • • . . . . . . . . • • . ... . . • • • •. 3 grammea Monohyd,rogeno-pnosphate de sodium ••• , .... , ... ,. O,8.g. Ceci est une copie du Journal Officiel de la RCI realisee par ERIS - infos@eris-ci.com l.-thlOVel1tbre-I993-- . JOURNAL OEEicIEL...DE LA REpr!Br TQI1E DE COTh D'NOIRE Dihydrogeno phosphate de sodium ........ '.' . . . .. 0,6 g. Lactose ...................................... " 10 grammes Saccharose " . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 10 gramIIleS' Rouge de pbenol ....•.....•......... . . . . . . . .. 0,09 g. Vert brillant .. : ... '.' . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . • . . 0,005 g. Agar-agar ••............••.•.............. ' 12 Ii 18 grammes Eau ....... . . . . . . . . . . . . . . . . • . • . . . . . . . . . . . 1 000 millilitres Dissoudie Ie milieu co':'plet des hydrate ou les compos ants de base dOshydrate dans reau en portant a: 6bulition. Ajusrer si necessaire Ie pH Ii 7,0. Repartir Ie milleu dans des tubes ou flacons appropries. Steriliser 15 minu\eS a.121'C ± I·C. R6partir Ie millen romplet dans. des bottes de Petri et laisser se solidifier. Juste avant l'emploi, seeher soigneusement les tio'ites de milieu isC (de pref6rence apres avair retire les couvercles et retatirne les bottes) dans une Ctuve reglee Ii 50'C ± I'C durant 30 minutes jusqu'a secbage de la snrface de la gelose. 14D Gelose nutririve Peptor:te pancreatique de caseine . . . . . . . . . . . . . . . . 5,0 g. Extrait de viande ............................ 3,0 g. Agar-agar .. '.' . ... ; ......... . . . . . . . . . . . . . . 12,0 g. Bau ............. : ...............•.•... , • 1 000 grammes Dissoudre dans reau les composants deshydrates ou Ie milieu complet d~shYdrate.~n poriant a .bumion. Ajouter Ie pH de telle s~ qu'll soit de 7 ,0 ~, O,l'apres stCriliSat,ion. Repartir Ie milieu dans des tubes a raison de 5 millilitres environ par tube. Steriliser a I'auloclave pendanl 15 minutes. 12I'C. Mettre 52 gramme. de poudre dans un litre d' .. u distillee. Porter a ebulition jusqu'b, 'dissolution complete eD agitant ·4uemment ( m05nrer la quantite d'eau it employer apres 'ebolition et refroidissement). Ne pas autoclaver Couler en botte de Petri. ISO Gelose TSI au cUral. tk fer.1 au Irois sucres E~trai\ de viande ............ : . . . . . . . . . . . . . . . .. 3 grammes Extrail de Ievore .............................. 3 grammes peptone '" ......... ......•.............. , . . 20 grammes Cblorure <lIo sodium .................... .-...... 5 grammes Lactose ....• '.' •........................ . . .. IO grammes Saccharose .••................. ' ...... '. . • • . . .. 10 grammes Glucose .......................•............... I gramme Cilr.!te de fer "(III) • . • • • . . • . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 0,3 g. Thiosulfa~ de sodium .... . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . •. 0,3 g. . . . ~uge de phenol ...................... : ........ 0,024 g. Agar-Ag<r .; ................ '.' .•.. .. .. 1ZA 18 grammes Bau •.................. : .................. 1 000 millilitres Dissoudre les composants des hydrates ou Ie milieu de base completdesb.ydrate dans I'eau en chauffant si n&essaire. Ajusrer Ie pH de sorle qu'apres sterilisation il soit de 7.4. Repartir Ie milleu dans des tubes Aessaipar quantile de 10 millilitres. Sterilise! pendant 10 minutes a I2I'C. L&sser reposer 'en position inclin~ de fa~n a obtenir, un culot de 2,5 em de profondeur. . "i6' Gilose Kligler- Hajna (milieu laclose-glucose H,~S) Pastone •........... , .. " . :' ................... 15'grammes Extrail de viande de baluf .....•••...••.•..•... " 3 grammes Extrail de Ievure ........... ............... : .. 3 grammes Peptone .. pepsique de vian9-e .•..• : : ........•.... " 5 grammes Chlorure de sodium .. '.' ......•............... " 5 grammes Su1fate ferreu~ ............ ' ....... ' . , ....... , . 0,2,g. Thiosulfate de sodium ..... , . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 0,3 g. C Lactose ... . . . . • . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 10 grainmes . Glucose ..................... :. . . . . . . . . . . . . . I gramme Rouge de phenol . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . • . . . . . . . . 0,024 g. Agar ..••... ,............ . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 11 grammes Eau distillce . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . • • . . . . . • . . .• l 000 millilitres pH~7.5±O,2 Mettre 53,S g. de poudre dans un litre d'eau distillee . Porter a 6bulitionjusqu'A dissolution complete. Bien melanger el repartir. Steriliser A I'autoclav" A 12I'C pendant 15 n1inutes. Refroidir en J.X>sition inclinee. B. -MODE OPERATOIRE '1 0 Prise d'essai, solurionnWTe. dilutions' L'echantiUon prelev6 aseptiquement est place au b'ain marie a 4S"C - 50'C jusqu" 1. decongelati9n. C Apres .voir melange soigneusement l'echantillon fondu, introduire aseptiquement 25 grammes du prodoit dans un nacon de dilution appropric contenant des billes de vcrre sterilisees. Ajouier 225 miliilirres do dilnant 1.1 ou 1.2 arm de r6a1iser une suspension au UIO (la solution mere). Boucher Ie flacon et agiler. Preparer ensuire 105 dilutions decimal ... Transvaser un' mffiilitre de la soln1ion mere dans un tube contenant 9 millilitres de diluanl steri~ melanger en utilisant un agitateur de lube appropne pour oblenir Ia dilution 10.2. . Reperer l'op&ation h patin:de la dilution 10.2. Proceder de ,maniere identique pour les dilutions suivantes : Chaque nouvelle dilution est effectuee avec une pipette d'un millilitre sterne dislincre. 2' Denombrement des gennes alrobies mesophiles Ensemcncernent : Prendre deu~ boites de Petri steriles. Transferer dans chacune d'elle, a l'aide d'une pipette sterne, un milli\itre de suspension' mere. ( , Recommencer I .. memes operations A partir des aulres dilutions. ·Couler dans chaque botte de Petri 15 milli\itres de I. golose pour denombremeut (2) prWablement foodue el refroidie l4S'C ±·O,SO'C. c c Ced est une copie du Journal Officiel de la RCI realisee par ERIS - infos@eris-ci,com JOI!iU<AL,0FFIe!EL-DE LA .!lliP~l:1QUE DE C<?TE P'IVoiRE·· ... 18 novembre 1993 Le temps qui s'ecoule entre Ie moment OU ron pr6pare les dilutions et celui ou l'on coule Ia gelose dans los bo1tes, ne doi! pas exe6der 15 minutes. M6langer soigneusement l'inoculum au milieu ct laisser solidifier en posan! los boitos de Petri sur nne surface fralcbe et horizontale. Couler a la surface du milieu ensemenee 4 miUilitros de la gelose blanche (3j prCalabiemenl fondue etramenee .. 4S'C. Leisser solidifier. Incubation: Retourner les bones ainsi preparees et les placer a. l'etuve a 30'C ± I'C pendanl 72 + 3 heutes. Denombrement; Proctder alors au comptage des colonies. Ne retenir pour Ie denombrelD:ent que les bo1tes contenant entre 30 et 300 colonies. 3' Dlnombrenuml des coliformes a) Denom.brement de coliformes en milieu solide : Ensemencement : t'rendre denx bo1tes de Petri sterilos. Tr.ansferer dans chacune d'elle, lll'aide d'une pipette sterile, un millilitre de la suspension mere. Recommencer les memes operations a. partir des autfes di"lutions. Couler dans chaque boite de .Petri environ 12 miUilitres de gelose VRBL (5) preaJablemenl fondue et ramenee a 45'C ± O,50·C. Melanger soigneusement l'inoculum. au milieu et laiSser solicillier les boiles d. P6tri sur une surface fralche el borizontale. Preparer egalement une boite temoin .vec 12 millilitres .d. milieu pour contr6Ie de sterilite. Apres solidification complete, coul~, ~ la surface du milieu eDsemenee environ 4 ·miUilitres de gelose VRBL (5) 4S'C ± O,SO'C. Laisser solidifier comme d6crit ci-dessus. " Incubation: Retowner Ies boites ainsi preparces et les placer a 1'6tuve a 30'C ± l'e pendant 24 hemes ± 2 heures. Repiquage : A partir de chaque lube de bouillon double coneen!ration incubi! positif prcsentant un degagement gazeux dans les cloches de DtUbam ensemencer a l'aide d'une aose bouclee, un tube de milieu sclectif simple concentration. Incuber a 30°C ± lOC pendant 48 ± 2 hemes. Denombrement : Pour chaque dilution, compter les tubes positifs, el calculer Ie nombre Ie plus probable a raide de tables de refuenee. 4' Dlnombrement des colifomtesfecaux a) DCoombremenldos coliformes fec.ux en milieu solide: Proceder selon les memes modalit6s" que pour les coliformes mats en portant los boites de Petri ensemencees A 44 'C ± 0,50'C pendant 24 heures a 48 heures.' b) DCnombrement en milieu liquide: (Methnde .avec calcul du norr,lbre Ie plus p:obable NPP). \1.epiqoer It raide d'une anse bouclec, 105 tubes de bouillon lactose bili6 au vert brillant trouves positifs lors du denombremmenl des colifOImes. Les tubes ensemenees sont incnbes. a 44'C ± O,SO'C pendant 24 henres a 48 heures, .. ' Compter les tubes positifs et calculer Ie nombre Ie plus probable it l'aide de tables de reference. 'S'Recherche et dtnombrement de stap/tymcoccus aureus, Ensemencement : Prendre deux boites !le Petri steri\es conteDant Ie milieu Baird Parker (7) et transferer avec !'D" pipette steri\~, 0,1 ml de la :suspension m~re ala surface de chaque bolte. Etaler rinoeu]um' raide d'un etaleor . de'verre sterile. . C - D6nombrement : Repeter l'opi!ration avec les dilutions suivantes si nCcessai!:e. Laisser seeber les bolles avec leur cOuyercle enviro~ 1S' minutes al. temperature ambiante. Incuher.: ·Proceder au comptage des colonies caracteristiques des coliformes (Colonies rouge-fonce ayanl O,S mm de diametre ou plus). . Retenir pour Ie denombremeot les boltes entre 15 et 150 colooi ••. b) Denombremenl des coliformes en mili.u liquide : (Methnde avec calenl du nombre Ie plus probable NPP). Ensemencement : Prendre trois tubes contenant 10 millililtes de milieu double concentration de BLBVB. (6.2). Transferer dans chacun de ces tubes, avec une pipette sterile, 10 millilittes de la suspension mere. Prendre ensuite trois lubes de milieu "Iectif simple coricentration (6.1). Tran.ferer dans chacun de cos lubes, avec une pipette, Un millilitre de la suspension mere. R6peter les mantes operations par Ics dilutions suivantes : Incubation: FaiI'e iDcuber Ies tubes de bouillon double concentration a 30'C ± I'C pendant 24 hemes ± 2 beures. Faae incuber Ies tubes de bouillon simple concentration a 30'C ± lbeure, pendant 48 heures ± 2 heures. Retourner los bolte. ainsi preparees et les faire incuber durant 24 heuros puis 48 houros dans reluve regl6e l 37'C ± l'C . DCnombrement : Denombrer Ies colonies typiques noires, brillantes, de diarnetre compris entre 0,5 el 2 millimetres presentant un lisere blanc opaqoe eotoure d'une aureole d'eclaircissement du milieu. Tenir compte pour Ie dtnombrement des bo1tes renfermanl iusqu·. 150 colonies. Denombrer separement les colonies atypiques. Choisir sur chaque bohe en vue de la confllmatioD 5 colonies typiques et I ou alypiques. Confumation (recherche de la coagulase) : A raide d'nn f11 sterile prelever une partie de chaque ,colonie seiectioooec ct l'enscmencer dans: ~ tube du bouillon. cerv~au~ • "",ur(8). Faire in9Uber .. 37'C pendant 20 .. 24 beures. Dans des tubes ster,i1cs a hemolysc, ajouter asep~quement 0,5 ml du \>Quillon cerveau-=ur (8) ensemence • 1,5 ml du plasma de lapin (9) (ou suivre los indications du fabricant). Agiter el incUber .. l'ituve • 37'C. Ceci est une copie du Journal Officiel de la RCI realisee par ERIS - infos@eris-ci.com l? uovembre 12~3 .. ·J.0URNAL-9FHGlEb DE LA· REPUBUQUE DE COTE D:~.. 897 v crifier la coagulation dll plasma au terme d'une periode ~e 24 beures, Considerer que la reaction est coagulase positive quand Ie coagulum occupe plus des trois quarts du volume initialement oceupe par I. liquid •. Calculer Ie nombre de staphylococcus aureus a ]'aide du pourcentage des lubes positifs. 6° Recherche des salmonella SP La technique de recherche des salmonella doit etre faite en trois phases: ' a) PIeenricbissement : 'Prendre aseptiquement 25 grammes d'6chantillon et ajouter 225 millilitres d'eau tamponnee sterile (1.1). Incuber pendant 16 a 20 heures a 37°C ± I 'C. b) Enrichissemenl : , A partir du milieu de' preenrichissement : Porter 2 millilitres dans deux tubes contenant 20 millilitres chacun de bouillon Muller Kauffmann au tetrathionate et au vert 'Uant (10) au o.i ml dans' deux lubes contenant chacun "~\J millilitres de qrllieu rappaport vassidialis (12), porter egalement 2 millilitres dans deux tubes cantenant 20 millilitres chacun de bouillon au selenite-cystine 01'), Fme jncuber A 31°C ± 1°C un tube de bouillon au selenite~cystine et un tube cantenant Ie bouillon Muller Kauffmann ou rappaport v~sidjalis ; Faire incuber a 43°e ± 1°C Un tube de bouillon selenite-cystine et un tube contenant Ie bouillon Muller Kauffmann au rappaport vassidialis. ' c) Isolement : Apres 24 beures d'incubation. effectuer, a partir des milieux d'enricbissement, des isolements it la surface de gelose au vert brillant - -rouge'de phenol '(13) et a la surface'd'un deuxieme milieu selectif au choix. Faire incuber Ies bolles de Petri a. 37°C ± loe pendant 24 beures 2 heures. Si Ie developpement est insuffisanl, poursuivre l'incubation. ' Les colonies lypiques de s~lmonel1a cultiv6e sur ,gelose au vert brillanl et au rouge de pb~nol sont roses bordees de rouge vii. ' S'il Y it presence de colonies caracteristiques ou suspectes repiquer 5 colonies sur gelose nutritive (14) et Ies soumettre ensuite aux ess~1s b~ocb\i,r,niques classiques., Utiliser de pr6ference les geloses TSI (15) o,u kliger ~16). • MINISTERE DE VEQUIPEMENT DES TRmSPORTS ET DU TOURISME ARRETE nO 120 MEIT. du 21 septembre 1993. - Sont nommes directeurs Mpartementaux du ministere de l'EquipemeD~ des Transports et du Tourisme.:· . 01. - DIRECTION REGIONALE D'ABIDJAN 01-1. -:DirecliGn dtpanememale d'Abidjan-Edilite M. Goboun Ouogou, mle 96972-R, ingenieur des Travaux publics de 1~ classe 3' echelon. 01-2. -Direction depanememale d'Abidjan-Yopougon M. Kongo Beugre, role 108396-X, ingenieur des Travaux publics de 1 ~ c\asse 2' echelon. 01-3. - Diredion departementale de Sesan M. Cmilibaly Fatogoma, mle 161 502~T, ingenieur des Techniques de 2' classe 4' echelon, 01-4. - Direction departementale d'Aboisso M. Agui Toussaint· Hubert, mle 128 471-S, ingenieur des Travaux publics de 'l:' c\asse 4< echelon, 01-5. - Direction departementa1e d'Adzope M. Goul~bi-Zah, mle 128476-X, ingenieur des Travaux publics de 2' classe 4' echelon. 01-6. - Direction d{partementale d'Agbovi/1e M. Kouassi Bodi Theodore, nlle 103416-K, ingenieur des C Travaux publics de 1 ~ classe 3' echelon. 01~7. - Direction depanimumta1e de Divo M. Djo Yapo, mle 110 342-A, ingeoieur des Travaux publics de l~classe 2' echelon. 01-8. -Direction ddpartenientale de llGSsaIe M. Gogo Dibo FrMt!£:ic, role 90 159-G, ing6nieur des Travaux publics de classe principale 3' echelon. 02. - DIRECTION REGIONALE DE DALOA 02-1. -Direction departementale de J>.aloa M. Essoh LillhBamabe, mle 130 427-Q, ingenieur des Travaux publics de 1~ classe 3' echelon. (;)2-2. - Direction departementale de Gagnoa M. N'Guessan Yao, 'mIe· do 367-B~ iDgemeur des Travaux publics de 1 ~ classe 1" echelon; . .'. 02-3. - Dir~ctiqn departementale de BouajIe l' , M. Konan Kouakou Adrien, role 103 415-J, ingenieur des Travaux publiCs de 1'" c\asse 3' echelon. .. , . 03. - DIRECTION REGIONALE DE KORHOGO 03-1. -Direction dtJ?artementale de Kq~hogo M. Nindjin Malan Joseph, role 154833,- ingenieur . des Travaux publics de 1;' ,c\asse 3' echelon. . 03-2. - Direction Dep~ljementa1e de Ferlcti , M. Coulibaly Innocent.B. role 59 488-F, ingenieur des Techniques de classe principale 1" echelon. 03-3 . ..:.. Direction departementale de BowuJiali ( M. Aka Ettiegne Eugene, mle·133 141-V. ingenieur des Travanx publics de 2' classe 4' echelon. /' 03-4. - DiTepion departementale de Tengrela ( M. Aounan N'Dri GuslJive, mJe 137 842, ingenieur. des Techniques de 2' c\asse 4' echelon.