Orden de 31 de enero de 1977 - Métodos de análisis de aceites y grasas, cereales y derivados, productos lácteos y productos derivados de la uva

15800 14 julio 1977 B. 0. i:lel E.~--Num. 167 DlSPONGO: Articulo uuico.~Se pronoga l!ttsta el dill trcinLa y uno de agosto de mil 11ov1,-ci!mtos stJt0JJta y siete la vigencia dcl Reol Decreto dos mil cir.>n',o clltorce/mil novocirmtos sctPnta y seis, a,., diechefa de julio, por d que se determina el rcndimicnto de los alcohoks de melazas procedentcs de la fabricaci6n de azuca.r df' r,;molacha y los procios dfl estos alcoholes para uso~ industrial es. Dado en Madrid a. onco do julio de mil novecif'nl.os setf'nta y 5iete. El Miu L~tru de Jii PJ·e:~idcnc.ia, JOSE MANUEL OTERO NOVAS JL:AN CARLOS 16116 OR.DEN de JI de enero de 1977 por la que se establecen Los Metodos Of!ciates de Amilisis de Aceites y Grasas, Cereales y Derivados . . Productos Lddeos y Productos Derivados de la Uva. Excel fn lisimos · seflores, · El Decreto 2519/ID74, de 9 -de ago5to, sobre entratla on v;gor, aplicaci6n y desarrollo del Codigo Alimentoirio Espanol, con templa la necesidad de completar la llOrmatlva vigente en pro ductos de consumo humuno, para lo que es imprescindiblo la fiiacion de limites de componentes en la normahza<.:ion de los dif?.rentos productos, limites que dependen en la mayoria de los casos de las tecnicas anallticrui a emplear. Por otra parte, la actuacion de los dlstintos Minfsterios en el ambito do sus re:ipectivas competencies, requiem el analisis de identicos componentos de los productos de consume humano, si bien ell diferentes fases de elabora.ciOn o comeroiallzaol6n. Por todo lo anterior, pal't'ce l6glco unlficar criterios y aunar esfuorzoo mediante el establecimjento de metodos de analisis of,ciales unlcos para todos lo:. Ministerios. Para la redac:ci6n de los citados metodos de anillisis, hocha conjuntamente por cuallficados espcciallslas de Jos Ministerios intereiitldos, se ha ccmslderado conveniente adaptarse en lo posib!e a los aprobfl.dos por Organiamas iD.ternacionales espo r.ializados on la materia, con el fin de aprovochar la experien cia hablda en su aplicaci.6n y de facilit!Y la confrontac:16n de los result.ados en las relacicmes comerciales supranaclonales, En consecwmcia, a propuesta de los Minlstros de! Etercito, Hacienda. Goberoaci6n, Industria, Agriculturn, y Comercio, esta P.re~idencia de! Gobicrno dispone: Primero.----Se aprueb,m como oficialcs Job metodos de anAli sis de Aceites y Grasas, Cereales y Derivados, Productos Lacteos y Productos Derivados de:, la Uva que se cit.an en Jos anexos l, 2, 3 y 4. Sogundo.-Cuando no existan metodos oficiales para deter• mi riados aoalisis, y hasta que soan estudiados por el Grupo d-. Tro.bajo correspondiente, podrim ser utilizados los adoptados por Organismos nacionalf'-~ o internacion'ales de rcconocida sol vmicia. Tercero.-Quedari derogadas la~ disposiciones de ig\Jal o in fr,•ior rango quo so opongan u la prc,;cnte Orden. Cuarlo.-La presente disp0sici6n entrarll eu vigor a los treln la dias de su publicad:On Gn cl •Bolotfn Oficial del E.~tado•. . Lo digo a VV. EE. a los proccden tes efectos. Dias guarde a VV. EE. Madrid, 31 de enero de 1977. OSORIO F, cmos. Sres. Minfatros del .Ej .:•rci to, llac-i en da, Gobernact6n, lndust.ria, Agri<::ulturn y Comercio. ANEXO I METODOS DI:: ANALISIS DE ACEJTES Y GRASAS l. PRl!PARACION DF LA \1UESTRJ, l. l. Princ,r,i-0. EstP. molodo establece lns condiciones generales de prepara ci6n de la muestra; las de caracter particular estlln indicadas en Jos metodos correspondientcs, 1.2. Procedimiento. 1.2.l. La muestra -e~ fluida y perfecLarnente lirnpia. Para todas las determinaciones, antes de realizar la toma parn ensai,o, agitt1.r la mr.estra como meclida d.e precauci(m. J.2.2. La mucstra es fluida, pero prescntu turbidez o mate, ria dcpositada. 1.2.l!.l. Para las determinacionos, lmpurazas, agua y malc rias volatile.~, e insaponificable, agltar energicamEmte la muss• tro p,ua homogeneizarla lo mejor posiblo •antes de la toma para en5ayo. 1.2 2.2. P&ra los dcm.:is metodos colocar la muestni. en estufa a. r,0° C. Cuando aqu+:;Ua alcance esta temperatura, agitar ener g1cam1mte. Dejar decante.r. Filtrar eobre pape) en la estufa m11nt2nida a 50° C. El filtrado debc scr limpio. 1.2.3. La muestra es s6Jida. Colocar en cstufa matenida a una temporatura 10° C supe• rior a la de fusi6n presumible de la muestra. Oprm,r como en 1.2.1 si la muest~a fundida. es fluida y perfoclamento limpia: Y Como en 1.2.2 s, la muu,tra. fundida present.a turbirlez o ma,. ten11 depositada. 1.3. Referencia. l. lnt.ernationuJ Union of Pure and Applied Ch\!mistry. Stan durd Methods for the Analysis of Olis, Fats and Soaps. 1964. II. A. 1. 2. Ctl.nACTEmEs ORGI\NOJ,t,PT!COS .'.!. 1. Principi.o. Caractercs organolepticos son las c;ualidades de la.~ sustan cias grasas peroeptibles directamentc por los sentidos. Por lo tanto, su determinaci6n fl!! fundamenta\mente subjetiva; no permiticndo establecer, en general, metodos concreto~ y de finidos. 2 ,2. A ~p<'ClO. Se considerare do aspccto correcto ouando .wmetida la mues tra de aceita, duranto U horaa, a una temjMratura de 20" C ± ± 2° C, se observe homog,;nl'.fl. limpia y transparente. 2.3. Olor y sa.bor .. Seran las normales sr ,g(m cl tipo de .iceite, y con los aroma~ propios y caracterist;cos, sin quc se advierta en njngun ca.~o sintomas organoleiitico~ de ra nuidcz. 2.4. Color. Variarll del amarillo al vcrdc. Par,4 los accites de o!iva y orujo se medira por el metodo clndicc de color A. B. T.~. En los dcmas aceltes refinados se medira en ol sistema Lovibund, utilizando cubetas de 5,25 pulgadas. ~. Jr,,·mcF llE COLOR A B. T. :u. Principia. Este niotodcr ti cne por obj eto establecer una. esca la u e ind i{;CS parn. la denominaci6n do\ color de Jos aceites de oliva y do semiHas, quo no contengan. examin.idos por la visi6n humana, tonalidad?.s rojizas, es decir, que s6lo representcn tonalidades variables del amarillo al irnrde. El indicc de color A. B. T. indica cuantos ml de una diso· luei6n l/15 M de fosfatu dis6dico de Sorensen debera con~n"'r por litro. una mezcla de dicha dlsoluci6n con otra 1/15 M de fosfe.to monopot!\sico, para qoe agregando un numcro suflciente de ml de una disolucion al 0,04 por 100 de azul de bromothnol. prepi, rada en la forma que se indica mas adelanto, sn origine una coloracion idontlca a la del aceite, examinando por trans parencia, con la vision humana, una cepa de 25 mm de espcsor, de la materia grasa y de la disolucion patr6n. 3 2. MateriQl y apQrato.~. 3.2.1. Tubos do Vidrio nnu!ro de 25 mm de diiunclro inl<Jrior y 110 mm de longitud. 3. 3. Reactivos. 3.3.l, Oisoluci6n 1/15 M de fosfato monopotai.&icu. Disolver 9,078 g de KH1P01 en agua dcsliladu y hervida, hash1 compkatar 1 litro. , 3.3.2. Dlsoluci6n 1/15 M de fosfoto dis6dico, Disolver 11,88 gramo5 de N112HPO, · 2H,O en agua de~tilada. y henida, hasta c<.nnpfotar 1 Jltro: B. 0. a.el E.-Num. 167 14 julio 1977 15801 3.3.3. Di.soluci6n de azul de t,n,motimol al 0,04 por 100. Tri turar en un mortem de a.gata 0,1 'g de azul de bromotimol, agregar, poca a poco, y removiendo, 3,5 ml de. NaOH o,o5N. Cuanda se ha disuelto, observandose s6lo la iurbldez lis:era, llovar tntegramente la disaluci6n a 1,m matraz aforada de 250 ml, utilizando p~ra la.var el marten, agua destilllda y her vida.. Agregar al matrai;:; agua deatilada y hervida hMta com pletar la cuarta parte de su volumen, y calenta.r en bafio de agua. a 80"-90" C, huta disoluc16n completa.. Enfrlar ha,,ta la tEmperatura o1mbiente, completando con agua destilada y her vida, hasta al enrase. 3.4. Procedimiento. 3,4.1. Preparaci6n de las patrones de color. Porier en cada uno de las · nueve iubos de vidrio, las volumones do las diso lucionoa de fosfato monopotAsico y dis6dioo que se indican en el cuadro que figura a contil:luaci6n. Agregar 2 ml de la diso luci6n de azul de bromotimol y asttar Jos tubos. Indke A. B. T. 0 25 50 75 100 125 150 175 200 Dieoh1cicn 1/15 Men ml. KH, PO, 50,00 48,75 47,50 48.25 45,DO 43,75 42,5(l 41,25 40,00 Oiaal11cion l/16 Men ml. Na,HP0,2.H,O 0,00 1,25 2,50 a,75 5,00 6,25 7,50 8,75 10,00 En esta 11scala el indice o corresponde al patr6n con colo raci6n amarilla y el aoo al de la verde, presentando los inter mooioi., tonos verdosos ascendentes del O al 200. Si es necesarlo prepara-r otras series con las mismas mezclas de fosfatos, pero poniendo volumenes mayores o menores de azul de bromotimo, para obtener intensidades mas fuertes o mas deblles del ttno normal que se fija en este metodo. De signar osto.s nuevos indices colocando entre pa.rentesie, a con t.inu11.ci6n de los que se ostableoan en csta metodo, el numero de ml de azul de bromotimol utilif.ados. Estos patroues s,e conservan mucho tlempo en la oscuridad. ba.stando un general una comprobra.cl6n cada ti mc.:sos, por comparacion oon disoluciones reclen preparadas. 3.4.2. Dete'rminaci6n del 'in.dice de color. El a.ceite cuyo co lo" se qulere. descrtblr debe tener una temper-atura aproxlmada de -20~ C y estar oompleta.mente transparente, mtrandose s1 prcsonta turbidtiz. Llenar de aceite hasta las tres cuartas p&rtos uno de loa tubos; observar por tra.nsparencia, mirando en direcci6n nor ma.l al eje de! tubo, con cua\ de lcs colores de la escala de p11.trones se identifica, colocando detras de Jos tubos una hoja do papel blanco. 3.5. Expresi-On de resu/todos. 3.5.1. El indice de color se e~pre~ara por un numero, corres pondiento a Jos ml de! patr{;n 1.:011 ul que ~o ha id1m\ific;;ado la muestra. 3.8. Referencia. 1. Institute de RacionA.liz11.cion dA! Trnuajo. Una Norma Espa n.ola 55.021. t. DENS!DAD 4 .1. Prln.cipi o. Se determina la. mass. de la unidad de volumen, exprosada en gramos por centfmetro cubico, a una temperatura dada. La densidad se represent& por d, I.a temporatw-a se ha de · controlar exactamente ya que la d;.msldad de las matcrias graso.s varia aproximadamonto 0,00088 por grade. La temperatura de la determlm1r:ion no diferira de la de re forencia en mas de 5° C. 4.2. Material )I a.p1:1.ratos. • 4.2.1. PicnOmetro normal, o con term6motro acoplado de 50 ml aproximadarnunte. 4.3. Procedimien.fo. 4.3.1, Aceltes y grasas liqaj.das. Para la determinaci6n de la densidi:t.d el picn6metro ha de e .. ttlr a la tempera.tura cons tante de! medio ambicntc. Llcnar el picn6metro hasa .al borde superior de! tuba capi.lar. introducir el termometro, posar y anota.r. la temperatura .de la detorminaci6n. 4.3.2. Grasas s6lidas. Llonar el picn6metro hasta las t."<Js cuartas partes, aproxlmadamente, de su altura, con · 1a s:rasa. Dejar l hora en estufa, a la temp ,ratura de fusion de la graSll, onfriar. posar. Al!adlr a.gua, a Ia tell!J)eratura de refe renda, hasta el bordo superlur de! picn6me1ro, dejar 1 hora en un bano a la tamparatura de ref,.rnnciu, S('car cl picn6metro y pesa.r. 4.4. Cdlculo. Calcular la densidad expresada en g/crn·' y referida a una temperatura que geI1eralmente sent. de 20" C para los aceites y de 40", 80" C, etc., para las grs.sas s61ida~; 4.4.1, Aceites y grasaa liquidas. P~-P Densidad = ---- D g/cm1 P'-P 4. 4 .2.. Gras as s6lidas. P"-P Den.~idad = -----, IP' -Pl- IP". -PHJ P = peso ,en g del plcnometro vacio. D g/r:m• P' = peso en g del picnometro Ueno r:on agua a la t.emperatu ra de referencia. PH= peso en g del pkn6metro Jleno con aceite a la tempera tura de referencta. p~' = peso en g del picn6metro Ueno con grasa y agua a la tem perature. de referencla. D = densldad del agua a la temperatura de la determlnaci6n !tabla 4.ll. ,.4.9. Corre-cciones. El valor de la densidad caku!a.do anteriormente puede co rregirse de! cfccta do! empuJe de! aite por la f6rmula . Densidad corregida = d + 0,0012 fl -·di d = densidad sin correglr. 4.5. Ob.~.irvanionos. La tempei'atura de la detcrmlnac!6n y la tempentura de referenda se relacionan en la sigulent.e for ma:. d' = d + Ct - t1 0,00068 s\ t > t' d' == d - Ct' - tl 0,00088 si t < t' d = densidad a la temperatura de la determinaci6n t, d' = densidad a la temperatw-a de referencia t'. 4.8. Rereroncias. l. International Union ol Pure and Applied Chemistry, Stan dard Methods for ;;he Analysis of Oils, Fals and Soaps. 1954. 2. Consejo Olelcola Internacional, 1007. TABLA 4.1 Densidad de! agua ,m functon de /a. hmJ.perotura, loman.do como un.idad la. masa de 1 mL do agu.a a 4" C o• 0,1199888 no 0,909637 ,' 21° O,Bll801!l 10 0,999927 12" 0,999525 22" 0,997697 2• 0,989&88 13° 0,99M04 2a• 0,\J97S65 3• 0,9991)92 140 0,\J992.71 24° 0,9973.83 40 1,000000 15° 0,989126 25° 0,997071 5• 0,999992 16° ·0,998970 21• 0,998810 r 0,999968 1'1° 0,898801 27" 0,998539 70 0,989929 18" 0,1198822 28" 0,998259 8" 0,9911878 19" 0,898492 29• 0,99S971 90 0,989808 20" 0,998230 30° 0,995673 10• 0,989726 J.os valor,:,s dados son numericumente iguaJ.'!s a la densidad absoluta An g/ml. 5. PRUEBA DEL fRIO Ii.I. Principio. Este metodo mide la resistencia. de la muesl.ra a la crista- · llzaci6n y se Uija corrientemente como un in.dice de los pi·o cosos do de~margari7.&r.i6n. Es aplicahle a todos los aceites veget,a.les y animaks refi nados y seeos. 5.2. Material )I apa-raios. s.:u. Frascos de vidrio de unos 115 nil, limpios y secos. 5!2!.2! Bafio 4• a.a;u,. :v. hh1l0: p,oceado .. Llonlll' un recipien te 15803 14 juJio 1977 B. 0. nel E.-Nu"m. 167 de 2 6 :i litros de capacida.d con hielo ftnamente machacado. y ai'iadir agua frla e.n cantidad suficiente para que quede cu bierto el cierre del frasco que contenga la mucstre. S.3. P1·ocedimiento. Filtrar una cantidad suficionte de murrntra (200 a 300 mil a traves de pap el dA flltro. Cal en tar el filtrado, agit{mdolo con tinuamente haste. quo adq1,1iera e:xact.amente una temperature. de 130" C. Llenar completarnente un fmsco con el aceite muestra fil trado y ~apur suavernente con un tap6n de corcho Llevar a 25" C en un bai'to de agua y recubrlr c;J tap(m con parafina. Sumergir el frasco en el bano agua-hielo, de forma que quede cubierto el clerre di, aqullL Reponer hie\o para mantener los O" C y el nivel pr:im'tivo Al cabo de cinco hora.s y media retirer cl frasco del bafto y exen11narlo detenidamente para ver ai 6e han fonnado eris• taJe,s o enturbe.mlento No confundir las burbujas de aim flna m?nte dlspersa.das con los cristales de grasa. La muestra habra rcsislido la pruoba si se conse:r>'a clara, llmpia y brillante. s.•. Expreston de resultados. Negativa o positiva. 5 5. Ol;servociones, El fin del ce.lentnm.ien to inicial es climinar le.s traze.s de humedad y destrulr Jos nucleos cr:istalinos que pueden e:xistir. Ambos lnterferirian la prueba ocaslona.ndo enturbiamiento per cri staJizaci6n premature. 5 . 6 R efe ren ci.as. American Oil Chemists' Society. Official and Tentative Me thods Ce 11-42, 2. Instituto de Racionalizaci6n de! Tro.!->ajo Una Norma Espa fiola 55. 042. ~ !NOICE DE REF'RACCJON !!U Prir.cipw. El indice de refracci6n de una sustancia dada. as la raz6n de la velocidad de un rayo de luz en el vacio a la velocida.d de luz a trav.:•s de la sustancia, Por convoniencia pr(lctica se refiere a la relaci6n aire-sustancia. Es igualmente la relaci6n de\ seno de! angnlo de mcldencla a! scno del angulo de refraccion. El IDdice de refracci6n de una sustancla dada vada con la longitud de onda de! rayo de Im: refractado y con la tempe ratura. Salvo indicacl6n contraria e] indlce de refra.ccion vie ne refer!do a la longitud de onda correspondiente a la Unea D 599.3 nm de la luz del sodio. El lndice de refraccion se indica con la notaci6n n' para t° C y longitud de onda de la llnea D del sodlo. Para otra radlaci6n de distinta Jongitud do onda at" C, la notacl6n sera nt,. Con los refract6metros usuales la observacion se hB.ce en luz difusa, provisto;; de un disposltivo de acromal.ismo de la rndia.ci6n D de la luz del sodio. e 2. l,tate~tal y aparatos. 6.2.1. Refract6metro de prec,si6n, que permits t•preciar como minimo las diezmil6simas, con prismas calentados por circula ci6n de lfquido termost.atado, ± 0,1° C. Puec\e uaarse una luz blanca si cl refract6metro ut.lliwdo posee un d!sposit.ivo de com• pen saci 6 n c,·o ma ti ca. 6.3. Procediiniento. El acelte debe estar limpio y exento de agua. Filtrnr sobrn papel de filtro seco, con la ayuda, si es necesario, de sulfate sodico anhidro. Llenar con Iii mat.eria grasa el espacio com prendido entre las dos prismas. Hacer la lecturn despues de 5 minutos, al msnos, de contacto. La temperatura de Jectura no debe sobrepasar en ± i~ la temperature. de referenciu.. 6.4. Cd/cu!o. Culcular el indice de refracci6n refcrido a lll temperatura dr, 20° para las grasas liquidas a esa ternperntura. y reforido a 40", 60°, so~ o temperaturas superiores par,1, las ·natcrias gra sas s6Jidas, nt = n 1' + Ct' - t) F st t' > t nt =-- nl' - (t - t'l F si t' < t n 1 =-. indicr, de rofraccl6n a la temperatura de referencia t0 • nt· - indice do refra~ct6n a la temperatura de lectura fo. F = factor de corrE'cci6n p0r temperature.. · F = o.ooo~s para t = 20• F = 0,00036 para t = 400 o superior, 6.5. Referencia.$, 1, International Union ot Pure and Applied Chemistry. Stan. do.rd Methods for the Analysis or Oils, Fa.ts and Soaps. 1004 ll-B.2. 2. Inst.ituto de Racionalizaci6n del Tre.bajo, Una Norma Espa nola ss.015, 7. PUNTQ DE FU,,ION 1 .1. Prin.c/pio. Las grasas y aceites naturales, come rnozc:Jas de gliceridos y otrm, sust<1.ncias no tienen pun to de fusion 11eto y· dafinido. No pres,. n tan pun to criti co de s6 lido a liq ul do; este p aso lo rea lizan grarlualmente a traves de este.dos pastosos hasta el com plet,rnrnn te liq uirlo Por ta! raz6n. el punto de fu~i6n de una grasa vie11e de flnido en cstc me{odo por dos temperaturas, Una, la inicial de eblandamient.0 desliza.nte, y ot.ra, final de lfquido perfecta. msnt.e llmplo. 7. 2. Mat eri-0 I y npa rtos 7 2. L Tnbo de vidrio en U de I. 4-1.5 mm de diametI-o, con ei;pesor de pared de 0,1.5--0,20 mm. l,.Jna de Jaa rnmas de 80 mi limetros de largo, y la otre. de eo mm (esta ligeramente abo cada en el extrema) Distancia entre Jas dos re.mas, 5 mm a pro. idmadamente. 7.2.2. Bario de aglu\ exenta de aim con dispositjvo de ca lefa,::ci6n lenta. 7.2.3. Term6metro haste 10• C, gra.duado en declmas de grado. 7 .3. Procedimiento. La determinHci6n exacta de las dos temperatuni,s, inicial y final, depende de las conchciones en quo se realice la solidifi caci6n de la mue,stra lntroducir la rama mas large de! tubo en la grasa fundida a una temperatm'R de 10" C superior al pun to de fusion pre sumib le. Deslizar la columna de grnsa tomada hasta l cm de! codo de! tuba; Ju columna de grasa sen\ aproximadamente de l cm de largo. La gmsa puede tambien introducirse al est.ado solido en eJ tubo, con ayuda de un hilo de plat.ino. Dejar enfriar el tuba con la grasa durante 24 horas a la tem perature ambiente fpor lo menos 10° mas baja que el punto lnicio.l de ablandamien \ol. Acoplar el tubo a lo largo de! term6metrn mediante un ani llo de goma, de forma que su curvatura coinctda con el bulbo del term6metro. Introducir term6metro y tubo en el bafio de agua; cuidnr q,1e el nivel de esta 5Ca inferior al de In rama mas corta. Calentat lentamente, a raz6n de 0,l·0,2° C por minuto, ob. servando con una lupa la columoa de; grasa, bien ilumimi.da sobra fond.a oscuro. La temperature inicial es aquello. en que la co lumna comienza a descender l;;e descuelge l . La tempera lura final coffesponde a la desapariclon de todo enturbiamien to y aspecto limpio. En caso de duda del punto final se compara el tuba de en sayo con otro con grasa netamente fundida. 7-4. Expresi-on de los resu!tados. Para utili,-:aci6n tecnica de res11Had os puede ser suficfrnte la indicad6n de la tempe=tura de! punto inicial. Pero si se utiliza s6lo la exprnsi6n, •Punto de fusi6n•, se i ndicarttn las doS temperatures, inicial y final. Si l{l. grasa Se he in trod uc1do en el tu bo al estado s6lido 6e hara cons tar, • Punt.a de fu si6n, (sin fundir pr~viamen tc la grasal. 7.5. Referencln. J Amcriuu:i Oil Chemists· Society. Official and Tentative Me thods. Cc l-25. 8 HlJMEDAD (Metodo de! XilolJ 8.1. Principio. Este mHodo determina la cantidad total de agua no com hinn cta que se encuentra en le maleria grasa. 6.2. Materia.l y aparatos. 8.2.1. Matraz de vidrio de cuello corto, d-e 300 a 500 ml de capacidad., sobre el cual se adapta el aparv.to especial repre sents.do en lafigura 9,1. Consta de un tuba cillndrlco graduado en ml. provisto de Have de descarga en el extremu inferior, en el sup,orior Se adapte un refrig,,n,nlr de reOujr, EntrE' tiste y la terminaci6n de la graduacion, Jleva el tubo cilindrico otro tuba comunic1mte y panllelo a el, a. cuyo extreme se ti.dap· ta el matrazi B. O. ilel E.-Num .. 187 14 Julio 1977 15803 8 3. Reactivo,. 8.3.L Xileno. 8.4. Procedimiento. Elirui.nar todo wstigio de gras,e de! tubo graduado y del tubo interior de! refrigeranto, lavanJ.o suce&ivamente con mez• eta cromlca, agua destilada y a.cotona. Seem·. Pesar de 21l a 50 • de materia grass, en el matru &eCO, con una u.prox.Jmaclon de 0,1 g. A,;rega.r de 100 a 300 ml de xileno y algunos trozos de piedra pomez. Ca.lent&,; progreshamente ha.sta la ebulliC16n y mantenerla hast& que el .xileno destllado resulto Jimpio y no separe mas agua. Dejar en .reposo has.ta perfecta separacion de w.s cap.as de xileno y ague.. Leer el volumen de ague.. 8.5. Cd.lculo. Cekuler el contenido. de agfra expresado en porcentaje. 100 V Agua = --· -- - % p P °" peso en g de la mue~tra. V c-, volumen en ml de ltgua.. 6.6. · Obsen,acion.es. Si· 1'" 1Jotas de qua quedw:, adberidas a la pared del tubo, desprenderlas cal.entando coD precaucron con una lhrnm pe quefla. 8.7. ficfer-111-u:ic.ll. l. E. W. Dean, D. D. Stark. Ind. Eng. Chern. 1920. 12. we. 2. Amerlca.n OU Chemists' Society. Official and Tentative Me thods. ca. 28.-45. . 3 lnstituto de Racionalizacion de! Trabajo. Una Norma Es pailola 55.001. tJ3-25mf. .... ~Ill E1 E N '° I 0 "' 65-75 m E E "' co J, L. .. Figura u.i. 11(.&. t-1:0MEDAD Y MATEFIIAS VOLATILBS (Metodo de la estu!a de a.ire) 9(a).l. Prln.clpio. Se establecen las condiciones adecuad11s para la determina ci6n, en las materia.s gra.sa.s, del e.gua y de las mat.arlas VQla tUes, operando en las oondiclonee de! ensayo. Es apllcablo a las grasas animales y vegetales,. con la e:ii: cepcl6n do los aceites seC1;Lntes o semi secantes y los a.celtes de! gnipo del coco. · 9{a1.2. Mat•rial y aparot0$. 9Cal .2.l. Estufa de desecacion, con regulacion de lampera-, tuni, pudUmdoSe calentar hast:G. 150" C como mfnimO; la regu lacion se efectuer.!. entre unos lfmites de Ollcilaci6n de ± r C. siendo. ademii.s, la temperature unifonne en todo el espacio interior, tolera.ndose diforenciaa que oo BJl:Codan de l" C IQlU'e posiciones 6Jltremas. &fal .2.2. · Ca.psulas de fondo plano, con dimen&iOlllt!I aprgxi madas de 80 mm dQ 0 y 20 mm de altu.re, prefm"iblemenw de ac&ro lnoxiduble o ahuni.nio o, en su defect.a, de poroelaM.. ocal.3.3. Desecador, conteniendo como a8ffl,te dasecanui sul fato cii,ldco o gel de siliCEI de 6-20 malltlll, o, en su de(ecto, . acido sulfurico monohidrato Cd== 1,8-il, aunque para asea;uru una desoc~i6n efectiva deberl!. oor renovado con frecuencla. IHal .3 . P r-o,: ed i mi ent o. 91al.:U. Preparaci6n de la muestrn.. La muestra debe 3er previamente homogeneizada antes de pesar la cantided con que se vaya a opel'!U'. Esto &e Iogra. coD lB.!I grase.11 fluidas, qite.ndo luertemente el frasco que con• tiene la muestra y Yertiendo rapidamente la cantidad aproxi mada que se vaya a pesar en la cill)$ula en la que ae efectQe la deaecacl6n. Si se tre.t&lle de gras!UI s6lidae o &emJs6lida!I a la temperatu:m arnbiente, cale-ntar !lllaveinente en bafto de agua basta coaseguir el grado de DUidez conveu,iente, ouidao do de no llegar a fundir completamente y homo~ con un me:i:clador adecuado o sJmplemento con una espl\tula 11 no se di~pusiese de este instrumento. eral.3.2. Tocnice. operatorla. · En una capsula, deseca.da preViamente en estuf& a 10:,• C ., enfriada. e!l un desecador, i-sar, con exactitu.d de l m.lligramo, una canttdad aproximeda de S a 10 g de muestra, seglln el contenido de humedad, pn,paradll coaio se 1ndica en 9lal.:S.l. Coloce.r en la BE1tufa. previamente regulada a 100' C. manta• niendola all! dUI1U1te 30 minut.ois. Sacar y pe.sar a un deeecador donde se deja enfriar; P8'AD(1o a contlnuaciOn. Repetir e:,te tratamiento. en operacioneB sucesiV11.B, hasta qua la dlferenc:ia entrc doa pesadas consecutlvas uo exceda del 0,05 pw 100, 9 ( a.l.4. Cdleu/os. Pa.-Pf % humedad y mElturia voli\til = ---- X 100 PM Siendo: Pa= peso, en gramos. de la capsula. con la muootra de gran. Pf= peso, en gramos, de la cll.psula coo. !a grasa al clar por terminada Ia desccaei6n. PM = peso, en gramos, de la muestra. 9(al.S. Referenctas. 1. In11titnto de Racionalizaci6n del Trabajo. Una Norma Espa. .0.ola 55.020. 2. International Union of Pure and Applied Chemistry St.an dard Methods for the Analysis of Oill!. Fata and Soape. UH, II. C.U. Q(bl. HUMEDAD Y MATEFIIAS VOLATILES CMetodo de la cstufa d,., vacio) 9(bl.l. Principio. Se estableei::n las condiciones adecuada.s para la determlna cl6n del agua y las materias voltr.tiles, ~ las eondicionoo del ensayo, en ·materias grasas comercialB!I. Es aplicable 11. todoa los aceltel y grasas del oomfil'Cio, lnclu yendo lo& aceites secantes y semisecantes. No es apllCflble a lo& IICflitea del grupo del coco, oonteniendo un 1 por 100 o mu da acidos gnt,toa UbrBlll, n.l a grau.s que hayan slclo a.dlcionadas de monoglic-eridos. elbl.2. Mater-ial y aparaioa, 9Chl.3.l. Emufa pe vacfo. Estufa en cuyo interlor pueda ha.cene el vaclo, bi\)n sea con trompa de a.gua. G can bombe, 15804 14 julio 1977 B. 0. iiel E.-Num. 167 de caracteristicas adecuadas, :pudiendO!le manteneT el vaclo con Ja estufa. desoc:upada, al limite maxlmo ali;:a,nzable con la trom :pa de asua o 1 mm de Hg cqmo mlnimo, 51 &e opera con bomba de aceite. En 1M oper:aclonee de dellecaci(m es proferible operar con tnmipa de agus.. · Ira provista de dlspositivos de calefacci6n y regulacicn de temperatura, pudiendose calentar hasta 110" C como m!nimo, regulAndose entre unos llmltes de oscilaclon ae ± 2°. C; la tem peratura sen\, adema&, uniforme en todo el espacio interior, tolerandoae diferenclas que no superen 1° C entre posioiones extremas. La estufa Ira provista de tenn6metro, convenientemente cali• brado, dispuesto de la forma conveniente para que el operador pueda comprobar, dunmte su funclonamiento, la ·tcmporatura que existe en el interior. IHbl.2.2. Capsulas de rondo· piano, con dimensione.s aproxl mada.s de 80 mm de diametro, de 20 mm' de altura, de acero lnoxidable, alwninio o porcela.na. f(b).2.3. Deaecador, contentendo como a1ente desecante eul• fato calclco o gel de If.Hee de &-20 ma.Has, Tambian puede ser utillza.do et acido sulfurico monobldrato (d = 1,&0. aunque para asegurar una desecacl6n erectiva debera ser renovado con fre• cuencia. 9lbl.3. Proce<Umiento. 9Cbl,3.l, Preparaci6n de la muestra. La muestra debe ser previamente homogeneizada antes de pesar la eantidad con que se va.ya a operar. Esto se logTa, con las grasas fiuida.s, agitando fuertement• el .frasco que las oon.• ticne y vertiend1;1 rapidarnente la caatidad aproxlmada que se · vaya a pesar en la capsula en la qua se efectue la desecaci6n. Si se tre.tase de grasas 16Hda.s o semi&6lida& a la temperatura amblente, c&lentar suavemente en bafl.o de agua hast.a oonse gu'r el grado de fiuidez convenlente, cuidando de no llegar a fund.Ir ·completamente y homogenelzar con un mezclador ade• cuado o simplmente con una espMula si no se dispuslese de este lnstrumento. 9Cbl.3.2, Tecnica operatoria, · En una capsule. desecad11. previamente en estufa & 105• C y enfrlada en un desecador, pe&ar, con exactltud de medio miH gramo, una cMtldad aproximada de 5 a 10 g de muestra, seglln el contenido de hwnedad, preparada como se ha 1ndlcado en 9lbJ.3.l, . Col~ar en la estufa y haeer el vacfo debiindose alcanz&r una presi6n interna que no sea superior a 100 mm Hg, Poner en marcha la cale!acci6n, nigulandose a la tempuratura en re lation a la presl6n lnterna de la eijtufa. Las condiciones norma les de trabaJo deben eer SO mm Hg y 60" C1 para una ptes!6n de 100 mm Hg, la temperatura eerA de 75• Ci para valores In• termedlos, se calcularA medi1mte interpolacltin entre las clfru lndlcadas. Mantener la eapsula en la eetufa durante una hora. Secar J pa.aar a un desecador donde se deja enfrlar, pesando a con tinuacl6n. Repetlr este tratamiento en operaclones suceslvas, hast& que la diferenciB entro dos pcsadas consecutlvas no exce da del 0,05 por 100. 9£bH. Calculo8. % humedad y matAri!\l volAtil .., PA-Pr PA-Po Po= peso, en gramos. de la capaula vacJa y seca. X 100 PA= peso, en gramos, de la capsula con Ia muestra de grasa. P,"" peso fl1:1al, en gramos, de la capsula con la grasa. al dar por terminada la desecacllln. D I b). s. Re fersncio:. 1. Instituto de Racionalizaci6n de! Trabajo, Una Norma. Espa fiola 35.082. 10. AClPEZ. !NOICE D'E ACIOEZ 10.l. Principui. La acidez que flgura normalmente en los boletines de ani lisis es una expres!On convenclonal del contenido en tanto por ciento de los acidos grasoa libres. Tambiea se denomlna grado de acldez. lndice de acidez, expre~a el peso,· en mg, de hidrOxldo pot6 sico necesario para neutraliur un gramo de matcrla grass, 10.2. Reaativoa. 10.2.1. Soluclon etanlllica. de hidr6:ddo potasico o,& N 6 O.l N. 10.2.2. Soluc!On al 1 por 100 de f&nolftalefna en metanol de DS por 100 v/9~ 10.2.3. Mezcla etanol-eter etllico, l:l, neutralizada e1rncta mente COil KOH 0,1 N etanul.ica, coll fenolftaleina wmo indi cador. 10.3. Pru(ladimiento. Posar con una aproximaci6n de. 0.01 g, 5 a 10 g de gra.sa, en un erlenmeyer de 250 ml. Diso1verla en 50 ml de la mezcla etanol-eter etilico. Valorer, agitando contlnuamente, wn KOH 0,5 N (o con 0,1 N para acldeces inferJores a 21, hasta vlrajo del indicador. 10,4. C(i!cu!o. Colcular la acidez como grado de acidez expresado en poraen taje de acido ole!co o coma indice de acidez expresado en mm gramos de KOH. VM N Grado de acidez "" --- % de acido olcico 10 p 56,l VN Ind.ice dP. ar.idez ;;:. p V = volumen en ml de solucion etaa6lica do KOH utilizada. N = normalidt.d 01r.acta. de la soluci6n de KOH utillzada. M = peso molecular de ilt:ido en que se expresa. la a.cidez. P = peso en gramos· de la muestra utillzat:lia.. Normalmente se expresa referida a tanto por r.iento de acido ·oloico. Solo en casos particu!ares, seg(m la natura.le:za de !a ·susta.ncia gra.Ra, SA Pxpre~ara roferida a ac!do palmltico, hi.urico u otros. 10 .• ~. Referencia.t. l. Intemacional Union o! Pure and Applied Chemistry. Stan dard Methods for tho Am,lysis of Oils, Fats and Sol!ps. t9&t.TI.D.1, 2. Institute de Racionalizaci6n de! Trabajo. Una Norma Es pal'lola 55.0ll, · 3. Conseio Olei~ula l ntel'll!!doni.l, 1967. · 11. !NmCi:: DI:: SAPONJFTCACJON 11.1. Principia. El lndlce de saponi.ficacicn e~presa el pesc en mg de hi• dr6xido potaelcu noccsario mua saponificar 1 g de grasa. Este metodo es aplicable a aceites y grasas con un conte nido de ceras inferiOl' al 5 por 100. 11.2. Matel'ial )I aparatos. 11.2. 1. Matra.z de vidrio, ii1ataco1 b!e 1>0r las acidos, de 200 ml aproxiniada.mcnte, adaptablo tt un refrigerante de re• flujo, 11.3. Rs1ucti'.11os. n.:u. Solucicn etanolic11 de hidr6xido potasico 0,5 N. 11.s.2: Solucilln acuosa de actdo clorhldrico o,s N. 11.3.3, Soluci6n de fenolftalelna al 1 por 100 en etan(.ll de 95°. 11.4. Procedtmiento. Pesar con una precision du l mg. on el matraz de vidric, 2 g aproitimadamente de grasa. Agregar 25 ml exaatamente me didos de solucl6n etan6lica de KOH 0,5 N, Adaptar el refrige rante de reflujo, llevar a ebullici6n, y mantener durante 60 .mi• nutos, agltando por rotaci6n de cua.ndo en cuando. Retlrar de la fuente de calor. Agregar 4 6 5 gotas de fenolftalelna, y valo rar la aolucl6n jabonosa, todavia cal!ente, con la soluci6n de Acido clorhidrico 0,5 N. · Roaliiar en la11 mism11s condici(.lncs un flnSRYO en blanco. 11.5. Cciicu!o. Calcular P.l lndice dP. sapm1ificacioo expresadn en mg de KOH por g de gTasa. 56,l N {V - V'l !ndice de saponificacion "' P V = volumen en ml de soluci6n de CIH 0,5 N utilizados en la prueba en blanco. v• = volumen en ml de solucl6n de ClH 0,5 N utUJzados en el ensayo. N :: normalidad exacta de I&. solucion de a.cido clorhidrico uti lizado. P .;:. peso en g de la muestra. de gra.s&,. B. 0. a.el E.-Num. 167 14 julio 1977 15805 11.6. Obsf'r-vaoioneB. Para ciertas materlas grasas dlf'iciles de saponificar es nece· sar1o calentar durante mas de 60 minutos. 11.7. Referencia8. l. K6ttstorfer J. Zeitschrift F. Anal. Chemie. 1879, 18, 189. 2. International Onion of Pure and Applied Chemistry. Standard Methods por the· Analysis of OHs, Fats e.nd Soaps 1004, H. D. 2. 3. lnstituto de Racionalizac16n del Trabajo, Una- norma espa i'io\a 55.012. 4. Consejo Oieicola Internacional, 1007. 12. !NOICE DE HIDROX!LO 12 .1. Prine ipio. El indice de hidr6xilo es el pG;lo on mg de hidr6xido potasico ne<:1osario para neutralizar el licldo 11.cetloo que se combina por acetilaci6n con 1 g de grasa. 12.2. Material y aporotos. 12 .:!. I. Dos ma.traces de vidrio de 150 ml con cuello de 55 milini.etros de largo y dhi.metro interior de 20 mm. 12.2.2. Pequefloe llmbudos de vidrio de 45 mm.' de di{unetro y 50 mm. de va.stago. . 12.2.-i. Placas de cart6n, circulares, de! die.metro de Joe ma• traces con un oriflcio circular en el centro de die.metro adap t.a.hlA al cuPllo de los matracos. 12.2.4. Bafia de g!icerina, ciue permita colocar los matra.cea en posici6n inclinada, introducidos l cin en el baf'lo, protegidos los cuellos por el carton que apoya en el borde exterior del ballo. 12.3. Reocbvos. 12.3.L Anhidrido acetico puro. 12.3.2. Plr!dina pura y sece., 12.3.3." Etanol 9S por 100, neutro a la fer2olftaleina. 12.3.4·. Soluci6n alcoh6\ica de hidr6xido pota~ico o,s N. 12.:1.5, Di$0luci6n alcoholica do fcnolftalc!na ul 1 por 100. 12.3.6. Reactivo plridina-anhidrido acetico. Introducir 25 mi• lilitr<». de piridina en un mat.raz aforBdo de 100 ml, di~o\ver los en 25 g de anhldrido acetico, homog,meizar y enrasar a 100 ml con piridina. Conservar este reactive al abrigo de la hu medad, de! anhidrido carb0nico o de los vapores acidos, en frascos de color topacio, bien iepados. 12.4. Proc,edimi1mto. Pfl1;ar en tll mntrnz purfectamflnte sPco, con una aprox:lmaci6n de 1 mg, !a cantidad de grasa nccu~aria, segfm el cuadro si guien te: =-===-------- -~"·::-c-.-----------,.-------· lndica Pc~o Vol. de provlsto de mues~ra reaclivo (I', ml. 10 100 2,0 5 100 - 150 1,5 5 ]50 200 1,0 5 200 250. 0,75 5 250 "- ·.we 0,5 6 5 1,2 10 300 - J50 1,0 IO 350 - 700 0,7,5 15 7()0- 950 0,50 rn 950 - 1.500 0,30 lS 1,500 -.2,000 0.20 15 . ····- ·-------·----·-· Agregar con una bureta el volumen de rcactivo. Regular el baiio de glicerina a 95• • 100• C. Colocar el disco de ,·nri6n alre-dedor de! c4ello del m11.tre.2. Situe.r perCectamente un embudo pequeiio seco en la boca del matraz a modo de re frigcranto de reflujo. Coloct1r el mutruz en el bafio c9mo se lndioa en 12.2.4. Al cabo de una hora retirar el matraz del bafi.o y dej ar en friar. Agrega.r por el embudo 1 ml de agua dest.ilada. Si la adici611 de! agu1,1 produce turbidez, hacer!a desape.recer agregando un poco do piridimt. Agitar. La mezcla se calentara por la trans fonnaci6n de! anhidrido acetico en Acido ac !!tico. Con el tin de complotar osta rcaccion y dcscomponer loe anh!dridos grasos y mi;:tos q,1r, hubieran podldo formarse, colocar de nuevo el matraz ei1 Pl 11,1110 de gliccrina duranl~ 10 mlnutos. Retirar 111 matraz del bafto, y dejar enft'ia1· a, la temperatura ambiente. ·' Agregar, lavandt.· las paredes del embudo y el cuello del mairaz, 6 ml de etMol de 115 per 100 v/v, contenie.ndo 2 6 3 gotas de so!uc!6n de fenoltalelna previameute neutrallz.ada. Valorar con soluclon etan61lca de hidroxido potAsic:o 0,5 N. Realizar eimu!taneamente un ensayo en blanco, en identicas cotidicionee. Cuando la fuerte coloracion de! media haga diflcll la obser vaclriri del viraje de la fenolftalelna, utlllzar como indicador una soluci6n de azu! a!calino ae. 12.5. Ca.lt:ulo. 58,1 N IV' - VJ lndice de hidroxifo = ------ + Tndice de s.cidez. p V = volumen en ml de soluci6n etanolica de hidr6x:1do pota sico 0,5 N de normalidad conocida, utillzados para el en sayo de la muestra. V' = volumen en mt de solucion etan6lica de hidr6xido pota•· sico 0,5 N de normaUdad conoclda, utilizadoa para el en sayo en blanco. N .::: normalidad exacta de esta solucion. P = peso en gramos de la muest.ra de grasa. El fndice de acide2 se determina oomo en to. 12.6. Referenclas. I. Cook, L. W. J. Am. Chem. Soc. 1922.44.392 . 2. American Oil Chemists' Socif!t,y, Official and Tent.ative M~ thods Cd-4-40. 3. lnstH11to de Raclonalizaci6n del Trabajo. Una norma espa ii.ola .55.014, 13, P.A.EPARACJON DE AC!DOS GRASOS INSOLUBLES 1:u. Principia. Se entiende por acidos graso5 insolubles de una grasa. !cs obtenidos por sapot1ificacl6n 'de aquella, descomposicion de! ja b6n form11do y alsfamiento eegun el procedimiento descrlto pos teriormente. Esta debe ser aplicedo rigurosamonte par la posibJP. presencia ge a.cidos graaos mas o menos solubles en agua. 13.2. Material y a,oal'Cltos. 13.2.1. Cap~ul!i de fondo redondo de apro'l'.ima.damP.nte 1..,00 mililitros. 13,3. React1vos. 13.3.1. Soluci6n etan61ica de hidroxido pot,asico. Diso!ver 18 g. de KOJ-t en 20 ml de agua destilada. y diluir con· 50 ml de etanol de 95°. 13.3.Z. Acldo sulhirico diluldo. Diluir un volumen d1:? acido concentrado Id = 1,841 con cuatrc volumeocY du ague. destilada. 13.3.3. Solueionacuosade C!Na al 10 por 100 p/v, I:!.4. Procedimien.to. Pesar en la capsula de 1.500 ml aproximadamentc so g. de gr11su · pruvh1.menta homogenAizada. Fundir lenta y progresiva mente calent11.11do hasta 115.· 118" C, Agitando y frotando cons tantemante con una espatula metalica se atlade la soluclon de hidr6xido potasico preparada. La relacl6n de grasa a soluoiiin etan6lica de hidr6:xldo potasico debe ser de ~ : 1, Se muuvc y frota constontemente la maea contenida en la cApsula, que ~o sigue calentando a fuego lento hula q ue el jabon oblfmido esie bastante seco para Cormar fragmentos que no se adhieran a la espatula por simple presl6n, Verter sabre el Jab6n 11n utro de a.gu.a destllada hirviente.· Mantener la ebulllcion de la solu.ci6D jabonosa durante 45 mi nutos do inanera quo se elimlne el alcohol Y. se obtenga una soll1ci6n clara. Suprimir el eslentamiento. Reempia2ar el agua evaporada con agua !ria. Verter con precaucl6n 70 ml de Acldo sulfli.rico diluido. Evltar que tra~as de Jab6n no descompuOl>to se ndhieran a las paredes o al borde de la capsula. Llevar a ebullic\6n y mantcnorla ha5ta que los acldos grasos libf1rados floten en forma de capa llmplda (en el caso particu lar en que la materia grasa contenga gliceridos del acldo laurico, esta operaci6n se hara sabre bafio de agua hirviente y no con ebulli ci6n de la cap a acuosa). . Lav12r Jos acldos dos veces co:.i 500 ml de soluci6n de CJNa hirviente. nP.spues de cada lavRdo eliminar tan comp!etamentc como S(;a posib!e !a capa acuosa. Pasar los acldos grasos a una r:ap~ul;,., adicionar sulfate s6dlco anhldro y filtrar sobre filtro seco. 13.5. Ob~ervaciones. Si la preparaci611 de los acidos grE1.sos tienc por objeto la determinacion del peso molee,J!.tr med!o, asegurarse que Ja ultlma capa acua5a elimin11.da es neut.ra al naranja de metno, 15806 14 julio 1977 B. 0. clel E.-Ni:i:m. 167 Si la preparaci6n de Jos acidos grasos tiene p.or objato la de" terminaci6n del Utulo, dejar Jqs llcidos grasos cristnllzar en un desecador a la tcmperatura de! laboratorio durante 24 horas antes de la determlnaci6n. 13.6. Referenda. 1. Instituto de Racion,dJzaciim del Trahaio. Una norma espa fiola 55 ,COIi. 14.1. Principia. u. !ITULO fMl'todo de D11.Ji{,-;nl El titulo oo cl punto dA solidif1n,cion de los acidos grason insolublei;, preparados segun 13. 14.2. Material y ap!lratas. 14.2.1. Tuba de ensayo de vid.-io de aproxime.damente 27,5 milimetros de di{unrtro "intnior y t2J n;u, d,a longitud, intro" ducido en una arandela de gome. quc le soporta y ac:tua de cierre de un frasco de boce. 11.ncha de 100 mm de diametro ex terior y 130 mm de alture.. El tuba Jntroducido en el fras,;;o debc sobresalir su parte superior 30 mm. sabre la arandola. 14.2.2. Term6metro de prccisi6n, grnduado en 1/10 6 Vs do grado, hasta 7rt' C, aproxim1<damenta. El deposito dcl tcrm6 metro tiene 20 mm de largo y 6 mn de diiun<otro. H.2.3. Soporte para ~u~ppnder v"rtkalm11nte el tenn6metro en el eje de) tubo de ,msayo. H.3. Procedimiento. Situar el frasco o recipieni.e ex1e:·ior a una tomperatura de 20° 6 25° C infrrior al titulo prnsumihle, sumergiendolo exterior mente en un bfliio de agua caliento o fria. Fundir los e.cidos grasos llevii.ndolos a una temperatura 10° C aproximadamente superior al tltulo presumible. Verter\os en el tu bo de ensayo has ta una altura de 5.~ milf m etro$, aproximadament.e. Colocar el teTI116metro suspendido con la mayor exactitud poslble en el Pje del tubo de etis,iyo y su extromidad inferior a l cm del fondo del tuba. Observar le. columna de mercurio; en prlnclpio baja rapldamente y d"'spues cad!l vez mas lenta mente. Simultaneamente, se abserva una crista!izacl6n de Jos acldns graso~ que parto dPl fnndo dd tuba y va recubriendo. poco a poco, la parte infP.rior del dep65ito del term6mtoro. Cuan do la columna de mercurio parece pararse, desptles de cuatro .observe.ciones, con cinco segundos rlc intervalo, lnmediatamente se imprlme al term<>mctro un movimiento circular, tres veces fl -la derecha y tres veces a la izq ui erda, teniendo cuidado de . romper bien las cristalo.~ quc, se forman on el tubo. Volver a co]Of:ar rapidBmPillP el termt",metro en el eje del tubo y observar de nuevo. La columna de mercurio, despuils de ha.her bajado brusca• mentP dure.ntc la agitaci6n, vuelve a subir, 1tlcaniando un maxi ma, pare. descender de nnevo. Esto maxima se toma oomo punto de solidificaclon de tos addoa.. inasoo o titulo,;. Se realizan determinaciones hasta obtener valores concordan tes, que no difieran en mas de 0,2" C. 14.-f. Expte3i6n. de r1t.mltadn.~. En grados oentigrados, 1ndk11ndo el metodo seguido. 14.5. Refrrenclas. 1. American Oil Chemists' Society, Offidal and TentaUvu Me thods. Cc, 12-41. 2. Instihito de R11cionaliiaci6n del Trabajo. Una norma e:-pa· ftol a 30. 308. ts. INDICE DE AC{DOS VOLATJLF'.S SOLUBLES F. l1'SOUlBLES 15.1. Principio. Se entiende por indica de acidos volatiles solubles (o indice de Reichert-Mdssl-Wollnyl al numero de ml de soluct6n alca lina ~,1 N necesarios para la neutralizac-l6n da los llcidos grB!los volalilei solubles en agua obtenidos cn las condicionea de! mt!l todo a partir de 5 g de grasa. Se enticnde por fndice de acidos volatiles Insolubles lo (ndtce de PolonskeJ al numero de ml de soluci6n 11.Jcalina 0,1 J:l nece sanos para la neut.:allzacion de los acidos gra.sos inliOlubJea en agua, obte nidos en las condiciones del metodo, a partir de 5 g de materia rasa El m~todo tienf! c'aracter convcncicnal, par tanto, mdge ob servar ngu,·osumen 1e las condicione3 prescritas, a fin de obtener resultados reproductibles. 15.2. Material y aparatos. 1-5.2.l. Apa:rato do vidrio, 5egun la figura ts.I, compuesto esencialmente de las partes sigui<lntos: 15,2 1.1. Matrn~ de fondo piano. de aproxinn1damente 300 mi Jilitms !Al. ' 15.2 1.2. Tuba de dob\,, codo, adaptAblc a matraz y rofrige ranto CBI. 15.2.1..~. Refrigerants ICJ. 15.2.l.4. Matraz de fondo piano, con tap6n esmerilado, mar caoos en su oue\lo los ,;,nra1;e1; do 100 y 110 ml, tare.do· (DI. J5.2. t.5. Placa de amianto o simil,:.r. para proteger la perife ria del mn.tra z d el oontacto di recto de la llama IEl. Dimons\o nes: Diamdro 120 mm. ( + 5 01ml. Rspesor, e mm. Orificio cen• trel circular de 45 mm de diamPtro, que soporta el matre.z du ran te el c;;lcn ta mien to. 15.2.2. Fuente de calor, que pennite efectuar ein modifica clon de regimen la destiladtin en el til'lmpo prescrilo. 15.3. Reoctivos. 15.3.1. G 1 icerina (d "" J ,201 , corr(>.1,pondicn te a 90 por 100, p/p, de glicerol neutro a la fenolftaleina. 15.3.2. Soluci6n acuosa de hidr6xido Mdico, 44 por too p/p. Evantualmente dejar calentur o filtrar ul abrigo del C~. La solucion empl,.,a,Ju delle cstar perrectamente limpia y clara. 15.3.3. Agu11 de6lilada, oxent.o. de CO, por reciente dmllicion. 15.3.4. Soluci6n de Addo .sulfurico N 15.3 .5. Sol o~.i6n aruosa de hi dr6xido -~o<lico o p<ltasico, o, 1 N. de normalido1d conocida exactamente. 15.3.11. Piedra p6mez en granos. Tamafio de grano, entrc l,5 y 2 mm. 15.4. Procedimirr.to. 15.1.1. Acidos vol>Hiles solubks. Pe,;ar exactanwnte en el ma traz tarado 5 g de matHric1 gras ~ 11 \a 0,01 do gramo. Agregar 20 g laproirimc1dttmente 16 mil de gl.cerol. Agr.,gar 2 ml de ln. soluc;6n rle hidroxido sodico al 44 par 100 pip, utilizando una bureta protegida contra el C01, descartando las primeras gotc1s. Calentar el matnoz ~obre una llama libre, agitando continua mente t.,.st,,, quc Ju grasa soa completamente saponificada, en este punto cl liqoido no formara mas espuma, y su aspecto set-A limpio. So evilara todo sobrecalentuonicnlo duranto la saponHi carion. Dejar enfriar hasta aproximadamentf> (JO' C. Agrllgllr 93 ml de agua dcs1.ilada calientc. llomogeneizar por agitaci6n; et llquido estarii. llrnpio. Agregar de 0,6 a 0,7 g de piedra p6mez en gra nos, do,;pues 50 ml de la soluci6n acuosa de 11.cido sulfurko N. Montar el matraz en el aparato. Calentar muy moderadrunente ha.sta quo los acidos graisos libcrados se rounan en 111.isupcrfkie, formo.ndo una cap,1 limpia. Esw.ble,:,er "1 regimen de oalefac ci6n de forma que en 19 a 21 minutnr; se rncojan no ml de des tilado. El dei;tilado sP recoge en el matraz aforado. Le. teml)e ratura del agua n la. salida de\ refrigerante debe e~lar com• prendlda entre 15° C y 20° C. La de£tilaci6n comienza cwu,do se forma la primer11 gola en la cxtrern,dad del tubo acodado unida a I refrig era n te. Int~rrurnpir la oalefacci6n c,uando el destilado alcance, exac tamente, el enrase de Jto ml en el rrmtraz. Retirar rapidamente este y colocar una probeta pequeii.a en su lugar. Colornr el matn,z en un tl!rmo,;tuto regulado a 15" C, durnnte 10 minutos, cl enrasc de 110 debl' e~tar uu centimetro por df'bajo del nivel de! \/quido tnrmost.ii,tico. Cerrar el rn1,traz ccm el tep6n ,-$niorilado y homogf>n;;iw.r el destilado invirtiendo 4 6 5 veces, con suAvidad, para evilar la formaci6n de espuma. Filtrar el lfquido ,;obre filtro s!n plicgues (diil.mQtro e cm). El filtre.do ha de ser totalmente limpk,, Modir 100 ml. Agregar 5 gotas de 5olud6n de fenolflalefna y valomr con solud6n aJcalina 0,1 N. Si mu ltim,,amen te rBRli:>.11r u n ensayo en b Janro sin ma.teria gratiB, snstituycndo la saponit'icaci6n sobro llama Hbre, por un calentamiento en bailo de egua hirviente dura.nte 15 minutos. 15.4.2. Acidos volatiles insolubles. DespuE\s de la valomcion de los (u:idos voltitiles ,;olublus. \a var el refrigta1rB]! te. el malraz aforndo y la Probctn pequdia, trcs vc(·cs suoesivus. empleando rada v1:z 15 ml de agua destilf!dn, exenta de carb6nico y frfa us~ Cl. La.~ trcs porcioncs tie ts ml i;e emplean para lavar, a continuaci6n, tres vece.~ el (iltro, llenanoo E!ste haste. el borde. El ultimo lavado recogldo aparte debe sf!r neutralizado par una gota de solucion alcalina 0,1 N. Lavar cl rofrig-erante, matraz aforado, probeta y fHro, tres Vf,ces sucesivas, emp!P.ando en cada operacion 15 ml de etanol neutralizado. Se rel'.men \os liquidos alc0h6l'cos de tavado (unos 4S mil. y se valoran r;on solud6n alcali na o, 1 N, utl.Uzando un6 gota de disoludon alcoh61ica de fenolftalefna. B. 0. del E.-Num. 187 14 julio 1977 15807 15.5. c,,lculo. lndice de acidos volatiles solubles o de Reichert-Meissl. 55N (V-V'J Indice AVS = p lndice tlt> A.cidu,; volatile£ insolubles, o indice Poh;nske. so NV" lndice A YI .-. p V = vol umen en ml de solucl6n alcalina 0.1 N, utilizados para el ensayo con la materia grasa, · V · = vol umen en ml de aoluci6n alcalina o, 1 N, utili·ta.dos para el ensayo en blanco. V" = volumen en ml de sotuci6n alcalina 0,1 N, utilitados para valonu· los llquidos alcoh61ico5 de lavado. ► ---- g . E D Fisura l5.1. P -= ·peso en g de la muestr1>1 en;,ayada. N ~ normelidad eucta de la solucl6n .ilcalina 0,1 N. 1.~.tl. Ob8er,,ac,one1. Si la cantidad de muestra de que se dispono no pormlte pe~ar 5 i', se puede r~aliur el analisis con una cantldad menor, siempre que so mantenga. por encima. de 2,5 g. En estos cases ses cornpletaran los 5 g con un aceite que tenga. indices de !\cldos volatiles solubles e insolubles Inferior a o,s. Se efectuarA en los cakulos las corrcspondientes correcciones. 15.7. Rrferencia5. 1. International Union of Pure a.od Applied Chemistry. Stan• de.rd Methods for the Analysis of Oils, Fats and Soaps, 1964'. II. D.9. 2. American Oil Chemists' Society. Ofricial and Tentative Me thod~ Cd, ~-40. lSta), TND!CE DE !ODO (Metodo de Wijsl .16!al.1. Prin.cipio. El indice do iodo de un cuerpo graso os funci6n de su grado dr. in~aturaci6n. Se determina afiadiendo a la muestra un exceao de reactive ha\ogenado, valorando el reactive que no reacciona. Se expresa convenc!onalmente por el peso de iodo abaorbido por clen partea en peso de la materia grasa. 16(al .2. Mater.al )I aparatos. 16(a).2.1. Navecillas de vidrio de 2 a 3 ml de capacidad. 16(al.2,2. Matraces erlenmeyer de vldrlo, de boca ancha, con tapon esmerilado, de aproximc1damente 300 ml. 'l'odo el mut,cria! debe estar ·perfcctamente limpic y soco . ·t6!al .3. Roorti\lDR . . 16 lal .3.1. Solucion acuosa de iod uro pota.sico al 10 por 100 p/v. Esto1, soluct6n debe estar exenta de iodo y do iodate potaslco. 16'!al.3.2. So!uci6n acuosa de tio$ulfi.to s6dico, 0,1 N. l6(al.3.3. Tetracloruro. de carbono puro. Comprobar que ostA exento de m11.terias oxidab!as, Agitando 10 ml con 1 ml dA $0lu cion acuosa sat.urada de dicrome.to potasico y 2 ml de. acido suiforico concentrado, no debe aparec,r coloraci6n verde. 16lal.3,4. Engrudo de almld6n, 16fal .3,5. Reactive de Wijs. 16(al.~.5.l. Con tr!cleruro de iode. Pesar 9 g de tricloruro de lode !Cl, en un matraz de Vidrio top~io de 1.500 ml; dlsolvor en un litre de una mezcle. oom puo!!la de 700 ml de acido acetico y 300 ml de tetracloruro de carbeno. Deterrninar el col).tenido en hal6geno de !a forma i;lguiente: Tom11r 5 ml y agrugar 5 ml de le. ao!uci6n acuosa de ioduro po tasico y 30 ml de ugui., Valorar con soluci6n de tiosulfato 96 r!i~o. o, 1 N en presenoia dff angrudo de almidon como indlcador. Agregar al reactive 10 g do iodo pulverize.do, y disolver egi• t.undo. Determinar el contenido en halogeno como · anteriormento; · dt•b.1 se.r lgual a vez y mudill. de la prinwra d .. -terminac16n. Agre. g11r tod11vie. una pequefta cantidad de iodo, de forma que sobre pa-~o lig,m1mente el limite de vez y media, por ser necesario qt1e no qu-.ide ninguna tra2a de tricloruro de iodo, cuya pre ~uncia provocaria reacciones secundarias. Dejflr de,:;anle!' dcspu(!5 de verter el liquido claro en un ma tra2 o fra-.co de ~olor topaclo. La soluci6n. blon conservada al abrigo de la luz, pucde s~r utilizada rlurent.e van.Os meses. l6Cal .3.S.2. Con monocloruro de iodo. Disolver 19 g de monocloruro de iodo en 1 litre de una mez cla de 700 ml de licido acetico y 300 ml de tetracloruro de car bono. Dt-spu6s do agrcgar una pequefta cantidad de lode puro (alguno~ mili~amosl, determinar el contenido en hal6geno, como se .realize anteriormente, y dilulr st es necesa.rio con la mezcla de disolventes basta que 5 ml de rsactivo eorrespondan aproxiniadarnente a 10 ml de solucl6n de tiosulfato s6dlco 0,1 N. 16 {al .4. Procooim ie11to. Segi:m el indice de iodo previsto, la tom.i de muestra varia• re. de !11 fonllll. siguienter <5 5 a 20 21 a 50 51 a 100 101 a 150 151 a 200 Tww. de muestr& I(. 3,00 1,00 0,80 0,30 0,20 0,15 15808 14 julio 1977 B. 0. cfel -E.- -Num. 167 En una. pequei\a navecilla de vidrio, pesar uacte.mente la canUdad llOOtll:iaria con una aproXlmaci6n de l mg. lntroducir la naveci.lla y su contenido en un erlenmeyer con tap(m eame rilado de aproximadamente 300 ml. Agregar 15 ml de tetraclo ruro de carbono y disolv0r. Agregar exa.ctamente 25 ml de! reac• livo. Taper el metraz, agiter ligeramente y protegerlo de la Juz. Dejar ester 1 hora para graaas cuyo indice sea inferior a 150 y 2 hora~ para. lllll de indice superior a 150 y los aceites po limer:lzo.des u oxide.dos. Agregar 20 ml de la solud6n de ioduro potasico y 150 ml de e.gua. Valorar con soluci6n de liosulfato s6dico 0,1 N. con cngrudo de almid6n como indicador, he.sta dli!saparici6n ju~la del color azul dospues de agitaci6n intensa. HacLT un ensayo en blanco sin materia grasa en las mi~ mas cnndiciones. 161n) .5. Cd!cu!o. 12.69 N (V -- V'J lndice de iodo = --~~ p P = peso en g de la muestra. V = vol um en on ml de la soluci6n de tiorulfat.o s6dico o, t N utilizados para el ensa.yo ,m blanco. V' == volumen en ml do solucl6n de tiosulfato s6dico o, 1 N uti li:z.adoa pai-a • la rnaterla grasa. N = ri.otmalidad de la soluci6n de tioslllfato s6dico utilJ:wda. rn<al6. Referencias. 1. z. angew. Chem. 1898. 11. 2e1. 2. foijtituto de Racionali:i:aci6n dol Trnbajo. Uua Norma Es panola 55.013. 16{bl. IND!CI,: DE IODO (Metodo de Fanusl 16 (bl . 1. Principio. Como 16 Cal .1. 16 Cb) .2. Materi"aL )' apara tos 16{bl2.1. Frasco de boca ancha, de 200 e 220 ml de capaci dad, con tapon asmerJ.Jedo. 16(bl.2.2. Buretas graduadas de 0.1 de ml, l•omprobadas y contnlsladas. 16{bl.2.3. Buretas o pipetas de 2s ml de salidR rapida. 16 [bl .3. Reactivos. l6(b l .3.1. TetracJoruro de carbon a, inl"rlc a I~ sol uci6n d-e Hanus. 161bl .3.2. Soluclon de loduro potasico al to por 100, exonta de iodo y de iodatos. 16(bl.9.3. Solucl6n de tiosulfato sMico o 1 N 16(bUl.4. Engrudo do 11.lmidOn. ' 16fbl .3.5. Reactive de Hanus: Dlsolver en un Crasco de colo.r il.marillo, con tapOn esmerilado, 10 g de monobromuro de lodo P.n 500 ml. de !\cido acetico cristalizablo 1911 - 100 por 1ool, exen. to de etanol. 16 (bl .4. Proc,1dimiento. Trabajar en luz difusa. En el frasco limplo y seco, posur de o.25 a 0,30 g de ma.teria grasa limpia y filtrada sobre pa.pel Uomar una cantidad de grasa tal que, una ve111 finaliz11.da la reacci6n, debera quedar ein absorber una ca.ntldad de iodo jgual, pot lo menos, al 70 por 100 de la cantidad total do lodo niiad!da. Disolver la materia grail& en to ml de tetracloruro de carbo no. Ali.adir, median.te burefa o pipeta de salida r!'.i.,pida, 25 mill lltros exactos del reactive de Hanus. Tupar el frasoo, mezclar par agitaci6n suave. Dejar reposar al abrigo de la luz duranto una. hors, a una temperatura de 20" ::!: 5° C. . Aiiadir 20 ml de solucion de ioduro potusico. y JOO ml de e.gua destilada. Mezclar. Valorar con la soluci6n do tiosulfato s6dico o 1 N (utilizando ungrudo de elrnid6n como indk,adorJ. agitnndo ~nstantemente. Ail.adir el engrudo de abnidon poco antes do fin!!.lizar la va loraci6n. RDalizar una prueba. en blanco en lder tir:as condidones. 16 lbl.5. Calcr;.lo. V-V· 111dice do iodo = ~---- t,269 P. V = volumon en m! de soluci6n de Hosu!!ato s6dico 0,1 N Utic liZRdoa en la prueba en blanco. V' = v11111men en ml de soluct6n de tiosulfato 56dico 0,1 N uti• · li:t:ados en el oneayo con la mu.estra. P = peso on g do la rnuestra ut.ilizados en !a determina~iun. 16(bl.6. Refe.rencia~. l. Ztdchr. Untersuch, Nahr. und Genussm. 190i. 4, Sl.'.I, 20. 2. Con9ejo Oleh;ola Internacional, 1967. 3. lnstituto de Raciorialiw.ci6n de! Trabajo Una Norma Espa 6ola 5.5.0l:I. H INDICE DE TIOCf.~t,;OGENO 17 .1. Principia. 1:1 indice de tiocian6geno de una mat81'ia grasa es fund6n de eu grad.a de insatura.cion. E'.:n la practice se determina par la fijacion de tioclan6geno, y conv,mcionalmente se cxpresa por el peso de iodo equiva.!ente al tiocian6geno absorbido por 100 partes en peso de la grasa. El tiocian6geno (SCN½ se flja sabre Jos dobles enlnces coma los halOgenos. Es menos reactivo que los hal6genos y su fijaci6n "6lo es cuantitatlva con el Acido olelco. Se considera que aproximadamentc el (SCNl, so fiia sobre un doble ealace de! a.cido linoleico y sobre dos dobles enlaces d el uci do lino Jen ico. 17.2. Material y apQrato.1. 17 .2.1. Navecilias do vldr io de 2 a 3 ml. 17.2.2. Matro.cos de vldrlo de boca esmerilada. 17.2.3. Embudo Buchner. Todo el material debe estar perfectament.e lavado y seco. 17.3. ReactivQs. 17.3.l. Acido acetico glacial puro. Antes de ijll empko Ct> lontarlo a ebulJicion con rcfrigcranw de reflujo, durnnto :l ho rs~, con 10 por 100 v/v de ru;ihldrido o.cetico. Dcstilar sobre an. hldrido fosfclrlco, 17.3.2. Tiocianato de plomo. ·msolver 250 g do e.cetato de plomo. quimicamente puro (CH.COO), Pb. 3 H,O en 500 ml de agUa destilada; disolvor 250 g do tiocianato potasico en 600 mi Jilitros de agua destilada, me:i:clar las dos soluciones, filtrar el tiociRoato de plomo preclpite.do sabre embudo Buchner. La.var con agua destllada, despues con etanol de 95 par 100 v/v, y por ultimo con Oxido de etilo. Secar el preclpitado tan completa mente como sea posible, medla.nte asplraci6n por vacfo; reco ger el precipitado en una capsula de porcelana,' y colocar esta en un desecador con snhidrido fosforico, durante ocho o diez dlas. El tioci;mato de plomo a.si obtenido debe prasentar color debilmente am!lrillo blanquecino o werduzco. Si se prosenta coloraci6n mas intensa. volver a some~erle al mismo tratumien to. Guardando en frasco arna.rillo--pardo, aJ abrigo de la luz, puede conservarse hasta dos meses. Si se ha coloreado ·1nten SRmon te no utilizarlo. 17.3.3. Bromo pure, previarnentc desecado. 17.3.4. Tetracloruro de carbono; agitar drn; veccs cl tetra cloruro de ce.rbono emple.ando cada vcz el 5 por 100 v/v de acido sulfurico concentrado. Separe.r el tetracloruro de carbono. Le.var con e.gua desti{ada, despui,s con 5 por 100 v/v de -una soluci6n acucsa de hidr6xido potasico al 60 par 100 p/v. Agilar con hidr6xido potasico en pastillas. Dcstilar sobre anhidrido fosf6rico. 17.3.5. Ioduro potasioo exento de iodo y iod.nto. 17.3.6. Soluci6n acuosa do tiosulfato s6dico 0,1 N de nurn1a lidad conocida. 17 .3.7. Soluci6n de tiocia.n6geno nproximadarnente 0,2 N. Po n er en suspension 50 g. de tiocianato de plomo en 500 ml de Acido ac6tioo. Disolver, por S<.1)arodo, 5,1 ml de bromo en 100 Iii.I do acido aclitico. Verter por Pequenas porciones la so luci6n de bromo on la soluci6n de tiociantito de plomo, Rgitando vigorosamente despuo§s de cada aclici6n hast11. decoloraci6n com pleta. Dcfar dccantar. Filtrar tan rapidamente coma sea posible por ombudo Buchner, prcviamento sec,1do, recogiendo el fH trado en un matraz soco. Colocar el embudo B(tchner sobre un scgundo matraz y fil-. trar de nuevo; el filtra.do debe ser limpio e lncoloro. Conser~ varlo en un frasco de vldrlo de color am!IJ'illo o pardo, de ta pon esmerilado, perfoctamento i;eoo. y en lugar fresco Ctempc ratura inferior a 20° Cl. De no ob.~crvar oota.s oondiclones se altera rapidamente, Antes de su uti\izac!On, oomprobar que permsneco lncoloro, (Cantin 1.mra.J '